基于多靶点调控民族药三百棒抗类风湿性关节炎的活性成分及作用机制的研究

Sanbaibang is a folk remedy, which has been used to treat rheumatoid arthritis by Tujia people in West Part of Hubei Province. This medicine chiefly comes from the root of three Rutaceae plants(Toddalia asiatica, Zanthoxylum echinocarpum Hemsl. and Zanthoxylum pashanense N. Chao). Based on preliminary studies, anti-rheumatoid arthritis effects and mechanism of three Rutaceae plants will be illustrated in this project. They will be evaluated for their anti-rheumatoid arthritis effects by using CIA mice model, and active compounds will be isolated under the guidance of activity evaluation. To clarify the mechanism of the treatment of Sanbaibang on RA, the regulatory of Sanbaibang on NF-κB, TLRs, JAK-STAT,MAPK and Wnt signaling pathway will be explored.

三百棒为鄂西恩施州土家族自治区常用的民族药物之一，主要用于类风湿性关节炎的治疗。该民族药主要来源于芸香科三种植物飞龙掌血、刺壳椒和巴山花椒的根皮，其民间应用存在同名异物现象。本项目在前期研究基础上，将CIA FLS细胞和RAW264.7巨噬细胞体外筛选、CIA小鼠在体模型动物评价与分子靶点筛选相结合，追踪分离三种三百棒基原植物（飞龙掌血、刺壳椒和巴山花椒）活性成分，系统阐明三百棒抗RA的活性物质及作用机制，重点围绕三百棒抗RA活性成分对炎症因子的网络调控与滑膜细胞增殖抑制两个方面，并以NF-κB p65为切入点，以与其相关的信号通路为研究对象，评价其抑制炎症细胞浸润、滑膜增生、保护关节软骨的作用，为三百棒的民间应用以及寻找和发现抗RA的活性成分或先导化合物提供科学依据。

三百棒为鄂西恩施州土家族自治区常用的民族药物之一，主要用于类风湿性关节炎的治疗。该民族药主要来源于芸香科三种植物飞龙掌血、刺壳椒和巴山花椒的根皮，其民间应用存在同名异物现象。本项目将CIA FLS细胞和RAW264.7巨噬细胞体外筛选、CIA小鼠在体模型动物评价与分子靶点筛选相结合，追踪分离三种三百棒基原植物（飞龙掌血、刺壳椒和巴山花椒）活性成分，系统阐明三百棒抗RA的活性物质及作用机制。.项目首先对三种药用植物的化学成分进行了系统研究。采用现代分离技术，从中共分离得到152个化合物。利用各种光谱方法（NMR、HRESIMS、IR、UV、ECD和X-ray单晶衍射）鉴定其化学结构。从飞龙掌血根皮和果实中分离出67个化合物，包括35个香豆素，8个生物碱，10个萜类，以及14个其他类。其中5个新化合物，化合物1~4为具有苯并菲啶类生物碱骈愈创木烷型倍半萜骨架的新化合物。从刺壳花椒根皮中分离得到59个化合物，包括30个香豆素，9个木脂素，2个生物碱和1个糖苷，其中17个新化合物。从巴山花椒根皮中分离得到26个化合物，包括16个木脂素，9个生物碱和1个香豆素，其中2个新化合物。.本项目还对三种药用植物的抗炎活性进行了评价，发现飞龙掌血抗炎活性明显优于其他两种药用植物。项目采用CIA小鼠在体模型动物评价了其抗RA活性，研究结果发现飞龙掌血能显著缓解CIA小鼠的关节症状，抑制滑膜和软骨的异常增生与侵蚀，其乙酸乙酯和生物碱部位是其抗RA的活性部位，skimmianine 和omphalocarpin是主要活性成分。.此外，项目还对飞龙掌血抗RA作用机制进行了研究。研究发现，飞龙掌血可通过抑制与RA相关的各种细胞中NF-κB的转录水平，进而调控各种炎性介质的释放并抑制与炎症相关的酶的活性和表达，同时通过调节Wnt信号通路中β-catenin、C-myc的表达水平，发挥抗增殖抗炎效应，从而抑制滑膜和软骨的异常增生与侵蚀。.本项目从化学成分和药效学层面对民族药三百棒的三种基原植物进行了系统研究，确立了将飞龙掌血当做民族药三百棒用于治疗RA的合理性，并为三百棒的民间应用提供科学依据。