基因修饰的去细胞同种异体神经修复颅内段面神经缺损

针对损伤灶神经组织不能在时间和空间上系统有序的完成再生和结构重建是制约颅内段面神经损伤修复的关键环节，本项目拟构建基因修饰的去细胞同种异体神经修复猴颅内段面神经缺损。将雪旺细胞纯化浓集后进行GDNF基因修饰，并复合于去胞神经支架上，合成神经复合体，分别通过光镜电镜观察其结构形态，了解雪旺细胞生长情况；植入实验动物体内评估支架的生物相容性。并以此修复实验猴损伤的颅内段面神经，观察猴的面肌运动，了解面神经功能；应用免疫荧光、神经示踪等技术了解神经元轴突、树突形成以及与相邻神经段内突触形成情况。应用基因芯片和蛋白质芯片检测技术，在分子水平和蛋白质水平探讨去细胞神经复合体促进猴颅内段面神经损伤后功能恢复的机制。本项目将基因治疗与组织工程学有机结合，有效促进颅内段面神经损伤后重建再生和功能恢复，为颅内段颅神经乃至周围神经损伤的修复提供新思路。

本项目自开题始，围绕雪旺细胞的培养、雪旺细胞的GDNF基因修饰、脱细胞神经支架（AECM）的制备、GDNF修饰的雪旺细胞与AECM复合体的构建以及猴颅内段面神经缺损的制作与修复开展工作。实验中摸索出改良植块法所得雪旺细胞活性及纯度较高。获取高纯度的雪旺细胞后转染GDNF，并将转染后的雪旺细胞接种于脱细胞神经支架上，构建复合体。并已成功将复合体植入猴颅内段面神经，并取得较好的实验结果。本实验应用基因重组技术获得具有活性的GDNF修饰的雪旺细胞；积累了较成熟脱细胞神经支架方法，构建了复合体成功修复猴颅内段面神经。在此基础上，课题组发表SCI论文4篇，中文核心期刊2篇，并成功申请广东省自然科学基金资助项目、广东省科技计划资助项目、中山大学高校基本业务费青年教师培育资助项目各一项。此项目的顺利开展为进一步深入研究神经损伤与修复奠定的良好的基础。