MAWD/MAWBP复合体调节TGF-beta通路的机理研究

TGF-beta通路影响着细胞的诸多生理活动，如增殖、分化、凋亡和胞外基质合成等。我们前期研究结果揭示，胃癌患者样本中MAWD的表达量较对应的癌旁组织明显下调。而且，我们还观察到，它的结合蛋白质MAWBP （MAWD binding protein）的表达量显著下降且两者具有显著的相关性。尽管，MAWBP的研究尚在早期阶段，但是有关其结合蛋白MAWD（putative human MAPK activator with WD repeats）的研究相对较多，已知它是抑制TGF-beta通路活化的一个重要蛋白质。我们假设，MAWBP可能通过和MAWD的相互作用对TGF-beta信号通路产生影响。为此，我们将通过构建高表达和RNAi的细胞模型，研究MAWBP/MAWD复合体对TGF-beta通路活性的调控，以及该通路的改变对胃癌细胞生物学行为的影响。

本项目研究发现，MAWBP/MAWD复合体对胃癌细胞的各种生理学行为有着重要的影响，进一步研究则揭示该种影响可能通过TGF-beta通路来进行。首先，我们确定，在胃癌细胞系BGC823中确实存在MAWBP/MAWD复合体。然后通过构建高表达和RNAi稳定细胞株，利用MTT、transwell、划痕实验、流式细胞仪等方法，发现MAWBP/MAWD复合体形成与否对细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡能力都有着影响。再运用Western Blot、组织化学、IP等方法研究发现，这种对胃癌细胞生物学行为的影响，与TGF-beta通路的活性变化有很强的关联性。该复合体可以调控该通路下游成员，如Smad家族成员的活性，影响其入核，从而导致细胞行为的变化。