E3泛素连接酶调控TGF-β1信号转导在肺纤维化中的作用及机制研究
基本信息
结项摘要
泛素-蛋白酶体通路中，E3泛素连接酶Smurf(Smad泛素化调节因子)和Arkadia通过泛素化修饰信号转导蛋白调控TGF-β1活性，新近研究表明其表达异常直接影响TGF-β1信号转导，并参与肾纤维化的发生发展。但是在肺纤维化中的表达和调控作用尚未见报道。本课题以大鼠肺纤维化模型及人肺成纤维细胞为研究对象，检测Smurf和Arkadia的表达，研究其与肺纤维化形成的相关性；再通过质粒转染过表达，以及siRNAs技术阻断Smurf和Arkadia表达，探索Smurf和Arkadia对人肺成纤维细胞生物学行为和TGF-β1信号转导的影响；并运用蛋白酶体抑制剂MG132，利用蛋白降解和泛素化活性的体外检测方法和免疫沉淀技术，探讨Smurf和Arkadia对TGF-β1信号转导通路影响的分子机制。本课题如能完成，可望为探索肺纤维化的发病机制开拓新思路，并为肺纤维化治疗提供一个新的分子靶点。
项目摘要
肺纤维化主要病理特征为炎性细胞浸润，成纤维细胞过度增殖，胞外基质大量合成、沉积。TGF-β1在这一过程中起着关键性作用。TGF-β1通过细胞内Smad信号转导通路发挥作用。近年研究发现，泛素-蛋白酶体通路是一个调节蛋白质降解与功能的重要系统。泛素-蛋白酶体途径中E3泛素连接酶能够促进泛素蛋白对靶蛋白进行选择性泛素化标记，最后引起降解。E3泛素连接酶Smurf和Arkadia通过选择性介导TGF-β1信号传导通路中关键组分的泛素化降解，在TGF-β1/Smads信号活性的调节中起枢纽作用，一旦功能失调，会导致异常的TGF-β1/Smads信号传导，并引起一系列疾病的病理生理学改变。但是，Smurf和Arkadia在肺纤维化中的表达和调控作用，尚未见报道。本研究通过检测博来霉素诱导的大鼠肺纤维化模型中Smurf和Arkadia的表达，发现：与对照组比较，模型组中Smurf2表达上调。体外研究发现，与对照组比较，TGF-β1刺激后人肺成纤维细胞 Smurf2表达增加，而Smurf1和Arkadia表达无变化。进一步使用Smurf2 siRNA转染人肺成纤维细胞，成功抑制Smurf2表达，然后检测I型胶原的合成和a-SMA的表达，结果发现，使用Smurf2 siRNA抑制Smurf2蛋白表达后，TGF-β1刺激的I型胶原合成和a-SMA表达均减少。这些结果提示，Smurf2参与了肺纤维形成过程。在TGF-β1刺激下，人肺成纤维细胞中Smad7和SnoN蛋白水平减少，分别运用MG132阻断泛素-蛋白酶体通路和Smurf2 siRNA抑制Smurf2蛋白表达后，Smad7和SnoN蛋白水平均有所增加，提示Smurf2可能通过泛素化降解Smad7和SnoN蛋白，进一步需要利用免疫共沉淀技术来明确。上述研究结果显示，Smurf2可能通过泛素化降解Smad7和SnoN，参与调控TGF-β1/Smads信号转导通路，从而参与肺纤维形成过程。关于其调控TGF-β1信号转导的确切机制，需要进一步研究证实。本项目明确了泛素化调节因子Smurf和Arkadia在博来霉素诱导的大鼠肺纤维化和人肺成纤维细胞中表达情况；初步探索了Smurf2对人肺成纤维细胞中TGF-β1/Smads信号转导通路的调控机制，从蛋白质泛素化角度研究肺纤维化的发病机制，为肺纤维化发病机制开辟新的研究
项目成果
{{i.achievement_title}}
{{i.achievement_title}}
暂无此项成果
数据更新时间：2023-05-31
其他相关文献
Intensive photocatalytic activity enhancement of Bi5O7I via coupling with band structure and content adjustable BiOBrxI1-x
Intensive photocatalytic activity enhancement of Bi5O7I via coupling with band structure and content adjustable BiOBrxI1-x
Asymmetric Synthesis of (S)-14-Methyl-1-octadecene, the Sex Pheromone of the Peach Leafminer Moth
Asymmetric Synthesis of (S)-14-Methyl-1-octadecene, the Sex Pheromone of the Peach Leafminer Moth
七羟基异黄酮通过 Id1 影响结直肠癌细胞增殖
七羟基异黄酮通过 Id1 影响结直肠癌细胞增殖
Sparse Coding Algorithm with Negentropy and Weighted ℓ1-Norm for Signal Reconstruction
Sparse Coding Algorithm with Negentropy and Weighted ℓ1-Norm for Signal Reconstruction
MicroRNAs in Transforming Growth Factor-Beta Signaling Pathway Associated With Fibrosis Involving Different Systems of the Human Body
MicroRNAs in Transforming Growth Factor-Beta Signaling Pathway Associated With Fibrosis Involving Different Systems of the Human Body
张敏的其他基金
相似国自然基金
E3泛素连接酶FBXL2在TGF-β1介导的肿瘤转移中的作用
番茄E3泛素连接酶LeSL1的免疫调控作用机制研究
E3泛素连接酶RNF8在肺癌转移中的作用及机制研究
E3泛素连接酶Smurf1的水平及活性调控机制的研究