NR5A2对急性胰腺炎腺泡细胞损伤修复的影响及其机制研究

The reason of development of acute pancreatitis (AP) to severe acute pancreatitis (SAP) is unclear. The most important character of SAP is acinar cell necrosis, which pathogenesis is also unclear. NR5A2 regulate acinar homeostasis, SAP will be aggravated by haploinsufficiency of NR5A2. We have found that the expression of NR5A2 was rare in acinar cell, which also target Wnt/β-catenin signaling pathway. One important repair mechanism of injury acinar cells is activation of TGFβ/smad3 signaling. Cross-talk between β-catenin/Tcf4 and TGFβ/smad3 signaling has been reported in other cell types. Thus we think that NR5A2 regulate acinar homeostasis, attenuate necrosis by activating the cross-talk between β-catenin/Tcf4 and TGFβ/smad3 signaling. In this study, we will evaluate the role of NR5A2 in acinar cell regeneration of caerulein-induced AP mice, the role of NR5A2 in cross-talk between β-catenin/Tcf4 and TGFβ/smad3 signaling in AR42J cell line, and the relationship between haploinsufficiency of NR5A2 and the risk of suffering from SAP for the first time, and to lay the theoretical foundation for judging prognosis and new preventing target of SAP.

急性胰腺炎发展为急性重症胰腺炎（SAP）的原因尚不清楚，腺泡细胞坏死是SAP的重要特征，但其机制不清。胰腺中NR5A2特异性表达于腺泡细胞，其单倍体不足可加重动物模型的SAP。我们前期发现NR5A2在SAP腺泡细胞中表达水平极低，且可以活化Wnt/β-catenin信号通路，提示NR5A2在腺泡细胞修复中发挥了作用，但内在机制尚不清楚。我们假设：NR5A2通过启动Wnt/β-catenin/Tcf4信号通路，调控TGFβ/smad3信号通路，参与腺泡细胞修复。拟通过观察NR5A2对蛙皮素诱导AP小鼠模型腺泡细胞修复的影响，观察AR42J细胞系中NR5A2对β-catenin/tcf4与TGFβ/smad3作用的调控，从动物和细胞水平观察NR5A2对SAP腺泡细胞修复的影响及其内在机制；首次探讨SAP患者NR5A2单倍体不足水平与临床特点的关系。本研究为SAP的预防和预后判断提供理论基础。

急性胰腺炎（Acute Pancreatitis，AP）发生时，胰腺腺泡细胞受损，若受损的腺泡细胞不能及时修复或凋亡，则走向坏死，产生“瀑布样效应”，发展为重症急性胰腺炎，病死率高达30%，但受损腺泡细胞修复的机制仍不清楚。在胰腺中，NR5A2特异性的表达于腺泡细胞，其可能是胰腺腺泡细胞损伤修复的重要调控因子之一，参与了急性胰腺炎的发展变化过程。本课题进一步研究分析了NR5A2对急性胰腺炎腺泡细胞损伤修复的影响及其潜在机制。. 本课题从三个方面进行了研究：在体功能验证结果发现，联合应用雨蛙素与脂多糖可诱导理想的小鼠急性胰腺炎模型，造模后4h至8h胰腺组织损伤最严重，模型组NR5A2和β-catenin在蛋白水平上较正常组表达量显著下调，TGFβ1在蛋白水平上表达量上调。离体机制检测结果发现，雨蛙素刺激大鼠胰腺腺泡细胞系（AR42J）24h，成功构建离体急性胰腺炎模型，模型组细胞淀粉酶及炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达水平显著上调，同时NR5A2的表达水平也随之变化；沉默AR42J 细胞的NR5A2，淀粉酶和炎症因子的表达水平显著上调，β-catenin的表达水平下调，TGFβ1的表达水平显著上调；过表达AR42J 细胞的NR5A2，淀粉酶和炎症因子的表达水平下调。临床检测结果发现，血清中NR5A2的表达水平很低，需要开发更灵敏的检测方法。. 本课题研究结果提示，NR5A2在急性胰腺炎腺泡细胞损伤修复中发挥着重要的作用，其机制与β-catenin和TGFβ1有关。我们的发现为了解急性胰腺炎的发病机制提供了重要依据，也为治疗急性胰腺炎提供了新的潜在靶点。