柴芩承气汤对急性胰腺炎大鼠胰腺腺泡细胞CCK信号传导通路的影响

血清高浓度的胆囊收缩素（CCK）与其受体(CCK受体1)相互作用，进而引起胰腺腺泡细胞钙超载是急性胰腺炎（AP）发病启动因素之一。在国家自然科学基金（No. 30500684）的资助下，我们的研究已经发现AP胰腺腺泡细胞存在钙超载，中药临床验方柴芩承气汤可缓解细胞内钙超载，减少胰酶的分泌，增加胰腺腺泡细胞的活力。在前期工作的基础上，我们拟进一步采用柴芩承气汤灌喂AP大鼠，采用Rt-PCR及Western blot技术检测胰腺腺泡细胞CCK受体1基因和蛋白表达，以及检测受体激活后PLC/IP3信号传导递质的变化，并与CCK受体1-RNA干扰AP大鼠进行对比，从钙超载形成的上游机制，探寻柴芩承气汤减轻AP大鼠胰腺病理损伤的具体作用靶点。深化对柴芩承气汤治疗急性胰腺炎机制的认识。

血清高浓度的胆囊收缩素（CCK）与其受体(CCK受体1)相互作用，进而引起胰腺腺泡细胞钙超载是急性胰腺炎（AP）发病的启动因素之一。本研究探讨临床疗效确切的中药方剂“柴芩承气汤”对AP小鼠血清CCK-8水平及大鼠胰腺腺泡细胞CCK信号传导通路的影响。研究结果发现：1、第0h，AP组、CQCQD组及siRNA组三组小鼠血清CCK-8和胰腺组织病理评分均明显高于对照组（P＜0.05），灌胃柴芩承气汤后的第2h、4h、6h、8h，AP组的血清CCK-8浓度均高于其余三组（P<0.05）；模型成功后的第4h, AP组、CQCQD组的胰腺组织病理评分高于对照组（P＜0.05），siRNA组与对照组比较胰腺组织病理评分无统计学差异（P>0.05）；第8h CQCQD组、siRNA组、对照组三组之间比较统计学上无差异（P>0.05），AP组胰腺组织病理评分仍高于其余三组（P＜0.05）。在控制其他因素不变的情况下，CCK-8浓度与胰腺组织病理评分成正相关（P=0.000）。2、AP组大鼠胰腺病理评分、胰腺腺泡内PLC浓度及IP3浓度高于对照组，CQCQD组。AP组胰腺腺泡细胞内[Ca2+]i的荧光强度高于CQCQD组及对照组（P<0.05），CQCQD组与对照组相互比较，无统计学差异（P<0.05）。AP组与对照组相比较，CCKR1 mRNA表达上调（表达率=1.761，P=0.024）；CQCQD组与AP组，CCKR1 mRNA表达下调（表达率=0.311，P=0.035）。AP组CCKR1与β-actin灰度值的比值高于对照组及CQCQD组(P=0.000)；但CQCQD组与对照组相比较，差异无统计学意义（P=0.309）。因此我们得出结论：1、AP发生不但与血清CCK-8水平升高有关，还与胰腺腺泡细胞CCK受体的mRNA和蛋白表达上调，细胞内PLC及IP3水平升高引起的胰腺腺泡细胞钙超载有关。2、CQCQD可通过降低AP血清CCK-8水平和下调胰腺腺泡细胞CCKR1的mRNA和蛋白表达，降低细胞内PLC及IP3水平，缓解胰腺腺泡细胞钙超载，减轻AP大鼠胰腺病理改变。.总之，通过本项目的研究进一步明确了CQCQD治疗AP的疗效机制，但是具体作用机制及CQCQD的有效成分尚需进一步研究。