Lefty蛋白抗积水肾纤维化作用及其机制研究

如何有效治疗肾脏纤维化是临床上亟待攻克的难题。理想的方法应当是既能减少胶原基质的生成又能促进其降解，但目前鲜有报道。我们前期研究中首次发现，人重度积水肾组织中lefty基因表达明显下调（-13.55倍），并在体外细胞培养中证实Lefty蛋白与肾纤维化关系密切；通过基因转染令细胞高表达Lefty后，可有效抑制TGF-β1诱导的肌成纤维细胞（MyoF）活化以及胶原蛋白的合成。本申请项目拟进一步应用串联亲和纯化（TAP）和生物质谱技术，在体外培养的细胞中寻找介导Lefty抗纤维化作用的靶蛋白；应用细胞共定位技术明确其胞内分布特点；应用转基因小鼠建立可复性CUUO模型，采用靶蛋白shRNA慢病毒载体局部注射，验证Lefty抑制积水后肾纤维化的体内效应；从而分析Lefty蛋白抑制胶原生成、促进胶原降解，产生"双效应"的分子机制。为临床延缓积水肾损害或促进肾功能恢复的防治奠定基础。

有效治疗肾脏纤维化是临床上亟待攻克的难题。理想的方法是既能减少胶原基质的生成又能促进其降解，但目前鲜有报道。我们前期研究中发现，人重度积水肾组织中Lefty基因表达明显下调；通过基因转染细胞获得高表达LeftyA后，可有效抑制TGF-β1诱导的肌成纤维细胞（MyoF）活化以及胶原蛋白的合成；这些前期研究证实Lefty蛋白与肾纤维化关系密切。本课题项目进一步应用基因芯片和免疫荧光定位等技术，在体外培养的细胞中寻找介导Lefty抗纤维化作用的靶蛋白；应用细胞共定位技术明确其胞内分布特点；应用小鼠建立可复性CUUO模型，采用腺病毒载体介导的Lefty局部注射，验证Lefty抑制积水后肾纤维化的体内效应；从而分析Lefty蛋白抑制胶原生成、促进胶原降解，产生“双效应”的分子机制。为临床延缓积水肾损害或促进肾功能恢复的防治奠定基础。