14-3-3蛋白调控CaV2.2通道膜转运及其机制研究

电压门控钙通道介导的钙信号大小对于下游的生理过程具有重要作用，其精密的调控机制是确保最佳胞内钙信号的关键。14-3-3 蛋白家族是真核细胞中高度保守的可溶性蛋白，在细胞凋亡、生长和增殖的信号转导过程中发挥关键的调节作用。我们前期工作表明14-3-3蛋白与CaV2.2通道相互作用减慢通道的失活，参与短程突触可塑性的调节。预实验发现14-3-3蛋白还能增强CaV2.2通道在细胞膜上的定位，提示14-3-3蛋白可能是调节电压门控钙通道膜转运的重要因素。相对于通道本身特性的调控，电压门控钙通道膜转运机理的研究被极大地忽略了，因此本课题试图结合生物化学、分子生物学、电生理学等多种研究方法，在细胞系、原代培养细胞和脑片等不同层次上研究14-3-3蛋白调控CaV2.2通道膜转运的过程及其机制，并阐明钙通道的膜转运在神经突触传递中的作用，为以电压门控钙通道膜转运为靶点的特异性干预手段提供重要的理论基础。

电压门控钙通道介导的钙信号大小对于下游的生理过程具有重要作用，其精密的调控机制是确保最佳胞内钙信号的关键。14-3-3 蛋白家族是真核细胞中高度保守的可溶性蛋白，在细胞凋亡、生长和增殖的信号转导过程中发挥关键的调节作用，并与CaV2.2通道相互作用减慢通道的失活，参与短程突触可塑性的调节。研究表明14-3-3蛋白促进膜上功能性Cav2.2通道表达,内源性dynamin不参与Cav2.2组成型内吞,Cav2.2可能通过Clathrin依赖的通路转运至胞膜, COPI和COPII衣被小泡参与14-3-3调控Cav2.2通道表达, 神经元内源性14-3-3亦促进膜上功能性Cav2.2通道表达，其机制可能是 14-3-3结合于Cav2.2a1B亚基C末端内质网滞留信号从而变构调控Cav2.2通道表达.