14-3-3蛋白与肾脏尿素转运

尿素转运蛋白（UT-A1）在维持肾脏髓质渗透压梯度中起着最重要的调节作用，.因此在机体维持尿液浓缩，调节水盐平衡及血压中，UT-A1 都起着重要的调节作用。基因序.列分析发现在UT-A1 的基因序列中存在着高度保守的14-3-3 蛋白结合区域，提示我们14-3-3蛋白可能在调控UT-A1 的活性中发挥重要作用。在预实验中我们发现14-3-3 gamma 特异性的结合UT-A1，而且这种结合依赖于UT-A1 的磷酸化。本课题继续研究1. 14-3-3 gamma 结合UT-A1 是否依赖于UT-A1 氨基酸序列的第567 位丝氨酸的磷酸化；2.14-3-3gamma 是否调节及如何调节UT-A1 的磷酸化3.14-3-3 gamma 是否影响尿素的转运活性。我们的研究将为调控肾脏UT-A1 的表达提供新的途径。

尿素转运蛋白（UT-A1）介导尿素的跨膜转运，在维持肾脏髓质渗透压梯度中起着最重要的调节作用。UT-A1的磷酸化是调节尿素转运的主要因素。14-3-3蛋白家族是一类在所有真核细胞中表达高度保守的蛋白质，通过依赖性和非依赖性磷酸化丝/苏氨酸途径与200多种靶蛋白相互作用。基因序列分析发现在UT-A1 的基因序列中存在着高度保守的14-3-3 蛋白结合区域，提示我们14-3-3蛋白可能在调控UT-A1 的活性中发挥重要作用。我们的课题研究14-3-3蛋白是否特异性结合UT-A1，调节UT-A1的磷酸化和尿素转运的活性。我们的研究发现14-3-3蛋白特异结合UT-A1，当UT-A1(S567A)突变后，失去与14-3-3γ的结合，明确14-3-3γ与UT-A1 接合位点为课题设想的UT-A1 氨基酸序列的第567位丝氨酸。转染14-3-3γ增加UT-A1的表达,并且增加细胞膜上UT-A1的表达。转染14-3-3γ，Forsklin作用后能够增加细胞膜上UT-A1的表达，提示14-3-3能增加UT-A1的磷酸化。