Syk(L)/Cyclin D1细胞信号通路在结直肠癌中的作用及其相关机制研究

Cyclin D1是最重要癌基因之一。我们已经证明在结肠癌中由于Syk(L)启动子甲基化造成表达缺失，具有抑癌基因功能；进而发现Syk(L)作为转录抑制因子可特异性下调Cyclin D1表达。因此提出"Syk(L)/Cyclin D1信号通路参与结直肠癌发生发展"的科学假设。本项目拟通过大样本临床资料探讨结肠腺瘤、局限性及转移性结肠癌中Syk(L)和Cyclin D1表达规律及它们之间相关性；沉寂结肠癌中Syk(L)表达，经体外细胞实验和动物活体成像实验，动态观察干预Syk(L)对Cyclin D1表达及肿瘤生长及转移的影响，从"细胞-动物-病人"多个层次揭示Syk(L)和Cyclin D1在结肠癌发生发展中作用。并通过启动子定点突变、荧光素酶分析、EMSA和CHIP进一步探讨Syk(L)下调Cyclin D1的具体机制。该研究的完成将对阐明结直肠癌发生发展机制和发现新的治疗靶点提供依据。

在国家自然科学基金的资助下，我们主要围绕SYK基因甲基化、遗传变异在结直肠癌发生发展中的作用及其功能开展研究，我们研究发现Syk基因甲基化与结直肠癌侵袭转移相关，肠癌组织及肠癌细胞系中Syk基因普遍甲基化，在肠癌及配对正常粘膜组织中，两者之间的表达差异比较具有显著的统计学意义(48.6 vs. 15.2 %, p< 0.001)。进一步研究发现Syk基因甲基化与其表达相关，通过去甲基化处理可以使Syk基因再表达。而过表达Syk可降低肠癌细胞株细胞增殖及侵袭能力。结合临床资料分析，Syk甲基化与肠癌组织分化程度，淋巴结转移情况以及TNM分期相关，多因素分析提示Syk甲基化是肠癌预后差的独立影响因子。此外，我们的研究也发现Syk基因遗传变异与结直肠癌易感性相关， Syk基因启动子区-803A＞T以及其基因-环境相互作用在肿瘤中起着重要作用。针对Syk基因启动子区-803A>T多态性在肠癌及匹配健康人群中进行筛选,并进行相关性分析，发现发现Syk-803TA、TT基因型和突变基因型(即TA+TT)是中国华南地区汉族人群罹患散发性结直肠癌的独立危险因素。在此研究工作基础上，我们还发现c-Jun、NFκBIA、p38β、MEK5等基因多态性与肠癌易感性相关，并且通过质粒构建、启动子点突变、萤光素酶报告基因试验、免疫印记试验证实相关基因多态性可能的作用机制。本项目系统研究 SYK基因甲基化与多态性与肿瘤发生发展的相关性，并进行了深入的机制研究，阐释syk基因甲基化导致肠癌侵袭转移的可能分子机制，为结直肠癌的早期筛查和临床诊断提供理论基础。