赤芝酸A乙酯以及其他灵芝中性三萜化合物逆转肿瘤多药耐药及其机制研究

On the basis of finding that neutral triterpenoid component of Ganoderma lucidumn has strong antitumor activity in vivo and a new neutral triterpenoid named ethyl lucidenates A has strong antitumor and reversal multidrug resistance activity in previous research, We will take some further research on the mechanism of ethyl lucidenates A reversing multidrug resistance and chemical composition of neutral triterpenoid component. Screening the compound isolated from Ganoderma lucidumn for antitumor and reversal multidrug resistance activity can help us to find some triterpene compounds with novel structure and enrich chemical structure diversity and active characteristics of neutral triterpenoid. Finding active constituents and possible mechanisms of reversal multidrug resistance of Ganoderma lucidumn lay a foundation for developing novel structural resistance reversal agent of cancer cell with high efficacy and lower toxicity.

本项目在前期研究发现灵芝中性三萜组分具有较强的体内抗肿瘤活性，灵芝中性三萜新化合物赤芝酸A乙酯具有较强的抗肿瘤、逆转肿瘤多药耐药作用的基础上，进一步研究赤芝酸A乙酯逆转肿瘤多药耐药的机理，并对灵芝中性三萜组分其进行系统的化学成分研究，对分离到的化合物进行抗肿瘤活性和逆转多药耐药的筛选，以期发现结构新颖的灵芝中性三萜类化合物，丰富灵芝化学结构多样性与中性三萜成分的活性特点，筛选出活性成分并深入研究其可能的逆转耐药的作用机制，为开发结构新颖的、高效低毒的肿瘤多药耐药逆转剂奠定基础。

多药耐药是肿瘤化疗的一个主要障碍，为了克服引起化疗失败的耐药现象，提高化疗药物的疗效，临床上需要筛选新的高效、低毒的耐药逆转剂。经过3年努力，课题组从天然药物灵芝中分离、纯化、鉴定了赤芝酸A乙酯及其他中性三萜类化合物共19个，其中包括3个新化合物；针对这些化合物进行了广泛的细胞毒活性筛选及对耐药细胞株K562/A02和KBv200 MDR逆转作用的测试；通过罗丹明累积实验、阿霉素累积实验、罗丹明123胞内分布实验、K562/A02细胞的P-gp mRNA表达水平实验、K562/A02细胞的P-gp蛋白表达水平实验等探讨赤芝酸A乙酯对K562/A02细胞逆转MDR的作用机制；人口底癌KV细胞裸鼠移植瘤模型研究灵芝中性三萜组分体内逆转MDR的研究。赤芝酸A乙酯在体外能增加阿霉素、长春新碱对K562/A02的细胞毒活性；ganoderiol F、5α-lanosta-7,9(11),24-triene-15α,26-dihydroxy-3-one及一个新化合物能在体外增加阿霉素对K562/A02和KBv200的细胞毒活性；赤芝酸A乙酯在体外具有抑制P-gp介导的底物外排的功能，能下调P-gp mRNA表达，但在蛋白水平上对P-gp无明显影响；灵芝中性三萜组分在体内能增强紫杉醇抗KV人口底癌作用。以上研究表明灵芝中性三萜类物质具有逆转肿瘤多药耐药的作用，其机制是调节P-gp的功能，如何调节还需我们进一步研究。