组蛋白甲基转移酶EZH2在慢性血栓栓塞性肺动脉高压血管重塑中的作用机制

Pulmonary vascular remodeling in CTEPH mainly related to the abnormal proliferation of pulmonary artery endothelial and smooth muscle cells, during which the phenomenon of aendothelial cells be/ smooth muscle-like cells transition(EnMT) involved in the composition of proliferation of smooth muscle cells. The above procedure is similar to the tumor manifestations. The gene level of histone methyltransferase EZH2 increased was found in a variety of tumors and EZH2 play an important carcinogenic effects through epigenetic modifications. However, the role of EZH2 in CTEPH vascular remodeling are uncovered. Our previous studies showed that EZH2 was not only significantly upregulated but also expressed in cytoplasmic expression in pulmonary vascular smooth cells of CTEPH patients. We believe that: EZH2 may play important roles in the process of vascular endothelial and smooth muscle cell proliferation and EnMT in CTEPH. In this project we will use the CTEPH tissue and cultured cells as a model to study 1) The mechanism of EZH2in endothelial and smooth muscle cell proliferation and cell cycle.2) EZH2 lead to EnMT and the mechanism in this course.3)EZH2 promote the movement of PASMCs through effecting cell cytoskeleton. Through comprehensive analysis of the roles and mechanism of EZH2 in vascular remoding, we aim to intervene CTEPH progress effectively and find better treatments.

血管重塑是慢性血栓栓塞性肺动脉高压（CTEPH)进展的重要因素。它主要涉及肺动脉内皮及平滑肌细胞的异常增殖，其间内皮间质细胞/平滑肌样细胞转化(EnMT)过程参与增殖平滑肌细胞组成，以上过程与肿瘤表现类似。组蛋白甲基转移酶EZH2在多种肿瘤中表达增高并通过表观遗传修饰发挥着重要的致癌作用。但EZH2在CTEPH血管重塑中的作用尚不明确。我们前期研究表明，EZH2在CTEPH病人肺血管平滑肌中出现明显的表达上调和胞浆表达。因此推测：EZH2在血管重塑的内皮和平滑肌细胞增殖及EnMT中可能发挥重要的作用。本项目将利用CTEPH组织和培养细胞为模型，研究1）EZH2在内皮和平滑肌细胞增殖和周期中的作用及机制2）EZH2在EnMT中起促进作用并明确其作用机制。3）EZH2用通过影响细胞骨架系统促进增殖平滑肌的运动。通过综合分析EZH2的作用机制，以期有效干预CTEPH的进展，找到更好的治疗方法。

慢性血栓栓塞性肺动脉高压（chronic thromboembolic pulmonary hypertension, CTEPH) 是急性肺栓塞或肺动脉原位血栓形成的长期后果，由于种种原因血栓未溶解而持续存在，通过机化、纤维化形成，最终进展至右心衰竭而死亡，在临床上发病隐匿，死亡率很高。随着研究的进展，研究人员逐渐认识到远端肺血管的重塑可能是影响CTEPH发展和预后的关键。很多研究已证实血管内皮细胞和平滑肌细胞异常增殖在CTEPH血管重塑中起重要作用，但其表观遗传学机制却知之甚少。结合表观遗传学理论进一步研究外环境改变所致肺动脉高压中DNA甲基化、组蛋白修饰和染色体重塑等表观遗传学规律，将有助我们了解基因-环境相互作用的疾病发生机理，深入全面的了解肺动脉高压进展的机制，进而指导肺动脉高压的治疗和新药的研发。.我们的研究通过建立过表达及基因敲除体系，利用细胞生物学、分子生物学手段对EZH2在CTEPH血管重塑过程中平滑肌细胞(PASMCS)功能紊乱中的作用进行研究，明确了内源性甲基转移酶EZH2的表达与定位，证实了EZH2对细胞凋亡和迁移的影响及CTEPH患者PASMCs的甲基化特征。.本研究得出了以下重要结果：.1、优化改进试验方法，提高了血栓内膜剥脱术后的组织细胞分离培养效率，并且证实了优化后的细胞具有平滑肌细胞特征；.2、证实了EZH2在CTEPH患者肺动脉平滑肌细胞中明显高表达，在致病中具有重要意义。.3、CTEPH患者平滑肌细胞抗凋亡及迁移能力增强，并且EZH2可能通过甲基化相关通路的某些基因影响其表达，从而参与该过程；.4、CTEPH 患者甲基化修饰特征与肿瘤相关通路等密切相关。.由于肺动脉高压属于多基因，多因素，多阶段，长时程的疾病。其受遗传因素和内外环境的影响，发病的病理过程类似于癌症的病理过程，因此本项目从与肺癌关系密切的甲基转移酶EZH2出发，将表观遗传学中的甲基化酶EZH2与肺动脉高压联系起来，这将有利于我们将内外环境因素整合起来，在整体水平上综合分析其CTEPH血管重塑病变中过程中的作用机制，从而找到更有预测和诊断价值的靶标分子。