DAX1基因调节胆汁酸受体FXR活性机制研究

目前心脑血管疾病及恶性肿瘤成为我国40岁以上成人死亡的首要原因。肥胖、高血压、高血脂、糖尿病等代谢紊乱是促发心梗和脑卒中的关键因素。而脂肪肝的发生又与上述疾病密切相关。胆汁酸受体（FXR）属于核受体超家族成员，FXR基因敲除小鼠表现为明显的脂肪肝及糖脂代谢异常。我们在肥胖、糖尿病、脂肪肝模型db/db小鼠及高脂喂养的小鼠中发现其肝脏中DAX1的表达高于正常对照小鼠。进一步研究发现DAX1与FXR不仅具有相互作用，而且DAX1可以抑制FXR对下游靶基因（SHP, BSEP）的转录激活。据此我们认为DAX1可能通过对FXR转录活性的调控，来调节肝脏的糖脂代谢。本课题组将在已取得的重要发现的基础上，通过进一步研究来阐明DAX1调控FXR转录活性的机制及DAX1在肝脏糖脂代谢中的作用。从而有助于阐明代谢研究中的一些重要理论问题，进而为治疗相关代谢性疾病提供新的可能的药物治疗靶点。

本研究通过在肥胖小鼠中发现其肝脏中DAX1的表达高于正常对照小鼠，以及FXR 基因敲除小鼠出现糖脂代谢紊乱为线索，来探讨DAX1在糖脂代谢中的作用及其可能机制。研究发现DAX1与FXR可共定位于细胞核中，且二者具有相互作用。通过报告基因、Real-time PCR以及siRNA等方法均发现DAX1可以抑制FXR对下游靶基因（SHP, BSEP）的转录激活作用，且此过程可能是通过与SRC-1竞争性的结合FXR来实现的。通过定点诱变构建携带不同LXXLL序列突变的DAX1发现，对于FXR的转录活性的抑制需要三个LXXLL序列的协同作用。此外我们还发现Pias3也可以抑制FXR对下游靶基因的转录激活作用，提示Pias3可能也参与了FXR对下游靶基因的转录调控过程。