化坚解毒活血法调节p53-microRNA200/HIF-1a发挥抗大肠癌转移的分子机制

In my country Colorectal Cancer incidence and mortality rates increased year by year, the transfer is an important cause of death. My research group has been confirmed the method of huajian-Jiedu-huoxue can influence the activation of ERK-MAPK pathway and down-regulation of ZEB1 expression。So，We according to p53-ZBE1 during two key factors microRNA200 family and HIF-1a proposed hypothesis that the law may affect substance by p53-microRNA200/HIF-1a way upstream of p53 transcription factor ZEB1, miR-200 family expression, HIF-1a and related factors, thus reversing EMT process, to Colorectal Cancer Metastasis purposes.Based on the real evil of metastatic colorectal cancer pathogenesis of toxic heat, phlegm, blood stasis, West Pill intended for use in projects with high metastatic colorectal cancer Lovo intervention cell line model of p53, HIF-1a and the expression of miR-200 family to detect targets and to explore the molecular mechanisms of anti-tumor metastasis of the Act。

我国大肠癌发病率和死亡率逐年上升，肿瘤转移是重要的致死原因。我课题组在前期已证实化坚解毒活血法可以影响ERK-MAPK通路激活进而下调ZEB1表达的基础上，抓住p53- ZBE1过程中的两个关键因素microRNA200家族和HIF-1a 为研究对象，提出假说，认为该法可能通过p53-microRNA200/HIF-1a途径影响转录因子ZEB1的上游物质p53、miR-200家族、HIF-1a及相关因子的表达，从而逆转EMT过程，达到抗大肠癌转移的目的。基于大肠癌转移邪实病机为热毒、痰结、血瘀阻络，项目拟选用西黄丸干预高转移大肠癌Lovo细胞株模型，对p53、HIF-1a及miR-200家族表达情况进行检测，来探索该法抗恶性肿瘤转移的靶点和分子机制.

在世界范围内，大肠癌居男性恶性肿瘤发病率第三位，居女性恶性肿瘤发病率第二位.近些年来我国大肠癌的发病率也呈逐渐上升趋势，且年龄趋于年轻化。理论研究认为癌转移的病机主要为正气内虚、邪实内聚两方面，为虚实错杂之证，且低氧微环境与大肠癌转移的病因病机“痰”“瘀”“毒”“虚”密切相关。为更好地发挥西黄丸的临床价值，运用现代生物技术手段探析西黄丸抗大肠癌转移的作用机制。本实验研究显示：西黄丸含药血清作用于人大肠癌LoVo细胞后，能够降低LoVo细胞BMI-1基因和蛋白的表达水平；使p53的表达水平有所上升，这可能是西黄丸干预大肠癌转移的分子机制之一。且西黄丸含药血清作用于人大肠癌LoVo细胞后，具有上调miR-141、miR-200a、miR-200c和miR-429表达水平的趋势，对miR-200b表达水平有下调的趋势。其中对miR-141、miR-200c和miR-429的调控趋势具有显著统计学差异。提示西黄丸可能影响具有抑癌作用的 miR-200家族，进而抑制与大肠癌转移密切相关的EMT过程以及肿瘤干细胞活性，起到防治大肠癌转移目的；西黄丸含药血清作用于低氧诱导后的人大肠癌LoVo细胞株，可以一定程度下调HIF-1α、VEGF、Slug、MDM2 mRNA和蛋白的表达，上调P53 mRNA和蛋白的表达。这可能是西黄丸通过HIF-1α/P53通路抗大肠癌转移的分子机制之一。