特异性肝血窦内皮祖细胞的鉴定及其在肝再生中的作用和调控机制研究

血管内皮祖细胞（EPC）参与胚胎期血管发生，也可在成年个体分化为内皮细胞（EC），维持血管网稳态和功能。我们发现肝切除-再生中约1/3的肝血窦内皮细胞（LSEC）来自骨髓，说明EPC参与肝再生；我们还发现Notch信号调控LSEC和EPC参与肝再生，论文发表在Hepatology等杂志。但成年不同组织EC具有异质性，它们是否具有各自的EPC?这些EPC具备怎样的功能又受何因素调控？我们前期研究发现：LSEC有别于普通EC，可高表达CD45；进而发现骨髓中含有CD45+EPC，它们极可能是LSEC特有的EPC，即SPC。为证实此观点，本项目拟从骨髓分离、鉴定CD45+SPC，观察其能否分化为LSEC，确定其相关细胞生物学功能，研究其在肝再生中的作用，探明其参与肝再生的调控机制，特别是Notch通路的调控作用。从而为深入了解EPC的特性和调控机制，为利用EPC治疗肝脏疾病奠定理论基础。

背景：肝损伤后，肝血窦内皮细胞（LSEC）的再生需要骨髓来源的肝血窦内皮祖细胞（SPC）的增殖、动员、募集和分化。在肝切除后，骨髓来源的SPC可以通过分泌肝细胞生长因子HGF促进肝细胞的增殖。本研究中，我们研究了SPC参与肝损伤修复过程的主要分子机制，特别是VEGF在其中的调控作用。方法：利用DMN诱导肝脏急性损伤模型，观察在肝脏损伤修复过程中SPC增殖、动员、募集和分化的变化。结果：DMN诱导的急性肝损伤模型可在诱导24小时后造成LSEC的脱失，并在48小时造成肝脏的广泛出血坏死。DMN诱导后24小时，骨髓SPC增殖和动员增加2-4倍。在5天时，约有40%的肝脏LSEC来源于骨髓。在体内降低VEGF的表达，可以显著抑制SPC的增殖、动员，向肝脏的募集和定向分化，并且加重肝脏的损害。结论：骨髓来源SPC参与DMN诱导的肝脏损伤修复进程，VEGF介导的SPC向肝脏的归巢可以减轻DMN引起的肝脏损害。