新荧光探针标记磷酸化蛋白的毛细管电泳测定和细胞成像研究

蛋白质可逆磷酸化过程几乎调节着生命活动的所有过程，且与某些重大疾病的发生发展密切相关。因此，对磷酸化蛋白的测定具有极为重要的意义。本项目拟设计合成具有下述结构特征的新型荧光探针：以对磷酸基有选择性反应的咪唑基为反应基团，以长波长的荧光量子点和花菁类、二吡咯甲烷-二氟化硼类化合物为荧光团。在此基础上，将探针对磷酸化蛋白进行选择性标记，使其适于毛细管电泳-激光诱导荧光检测和细胞成像，建立简便、灵敏、无损的磷酸化蛋白检测方法，并用于细胞和蛋白质复合物中磷酸化蛋白的分析、蛋白激酶和磷酸酶活性的研究。本项目的完成将促进基于荧光探针的毛细管电泳和细胞成像法的发展，丰富蛋白质组学的研究方法，加深对与蛋白质磷酸化相关的生理及病理过程的了解；为从细胞和分子水平上深刻认识生命的化学本质与基本过程提供重要的手段，同时也将为重大疾病的早期诊断及疗效评价提供有效的工具。