人体内耳毛细胞从胚胎干细胞的高纯度分化及Cdx2基因的可能促进作用

听力障碍从发病率到生活危害都对社会和个人有着极大的影响。干细胞研究在疾病治疗方面越来越引起人们的兴趣。本课题依据发育生物学原理，利用人体胚胎干细胞诱导为耳基板前体细胞并对其纯化，探索影响其分化为具有成熟毛细胞的条件和因素，并检查所得毛细胞的生理功能和体内表现。通过基因芯片的手段筛选体外诱导毛细胞分化过程中新的关键基因，并同时探索新的候选基因Cdx2对Notch-Hath1通路以及毛细胞分化的影响。本课题的实施和完成将为耳聋的临床细胞治疗迈出实质性的一步，为内耳的发育生物学以及毛细胞再生提供体外研究模型，并发现毛细胞分化过程中可能的新关键基因，拓展和深化内耳毛细胞分化和再生的机理研究。

毛细胞和螺旋神经节细胞的损伤和缺失是感音性耳聋的主要原因。国内外对干细胞向毛细胞（HC）和螺旋神经节细胞（SGN）已有了多方面的进展。但免疫排斥和安全性问题仍然是临床应用的重要障碍。为了进一步迈向临床，我们利用自体的干细胞-精原干细胞体外分化得到了拥有多种特征性荧光标记染色的毛细胞，并且证明了毛细胞的机械性电流通道的存在，通过电镜扫描和抗体染色，证明了疑似纤毛结构的存在。利用流产胎儿的干细胞的体外分化，得到典型的纤毛标记染色。利用自体干细胞，我们已经得到了标记染色，电流功能类似SGN的细胞，在体外与毛细胞的共培养中形态和结构上得到了Synaptophysin的染色，体内看到了外源类SGN的存活和分化。总之，我们在不同水平上应用不同来源的干细胞得到了向毛细胞和螺旋神经节细胞的分化证据和结果。