CKS1基因影响鼻咽癌细胞增殖和侵袭的机制研究

Cdc28 protein kinase regulatory submit 1(CKS1) has been well documented its role in regulating cell cycle by ubiquting the cell cycle inhibitor P27.CKS1 has been found high expressed in multi-tumors and been presumed to be a potential factor in tumor diagnosis and prognosis. Our datas shown that high-expression of CKS1 was found in nasopharyngeal carcinoma(NPC). Knock-down of CKS1 in NPC cell line by si-RNA reduced to cell apoptosis and growth inhibition through inactivation of MAPK cell signaling pathway and low-expression of SKP2. Furthermore, we found that forced expression of CKS1 by lentivirus vector-mediated CKS1-DNA transfection in NPC cells increased drug-resistance. Under the base of our previous research, we would study the relationship between CKS1 expression and NPC in various clinical stages. The functional role and mechanisms of CKS1 in NPC would perstetured on which influence cell proliferation and survival. .In this study, we aim to further demonstrate that CKS1 plays a crucial role in NPC cell growth and survival and provid more applications for cancer treatment.

细胞周期蛋白激酶亚基1（CKS1）蛋白参与细胞周期的调控，促进细胞增殖，目前已发现CKS1基因在多种肿瘤中高表达，并且与多种肿瘤的癌变和进展相关，被认为是潜在的诊断和预后因子。我们发现在鼻咽癌肿瘤组织中也存在CKS1基因高表达，并且CKS1基因沉默引起MAPK细胞内信号转导通路失磷酸化，并引起细胞周期泛素化酶SKP2表达降低，导致鼻咽癌细胞凋亡和生长抑制。CKS1基因过表达的鼻咽癌细胞对化疗药物顺铂的杀细胞作用存在耐受。这些研究基础提示，CKS1基因可能影响鼻咽癌细胞的增殖和耐药，与鼻咽癌的癌变和发展相关。我们将在此研究基础上进一步探讨CKS1基因高表达与鼻咽癌不同临床分期的关系，研究CKS1在鼻咽癌中的作用，及其影响肿瘤细胞增殖和耐药的机制，为临床更好的治疗鼻咽癌提供新的思路。

鼻咽癌是好发于中国南方及东南亚的头颈部恶性肿瘤。早期诊断，和放疗及联合化疗能有效的提高患者生存率。但是，而肿瘤细胞对放射线的敏感性降，导致肿瘤复发或远处转移的是造成中晚期患者治疗效果不好的原因之一。因此，探寻新的鼻咽癌预后相关因子，特别是有效的放疗增敏因子，将为临床有效治疗鼻咽癌提高新的思路。.CKS1基因编码的cks1蛋白是泛素连接酶复合物SCF-SKP2-Cks1的组成部分，在细胞、分化、增殖过程中起重要作用。并且已经在多种肿瘤中发现有cks1蛋白异常表达，并且与肿瘤的进展相关。但是，CKS1基因在鼻咽癌中的作用及机制尚未有人研究。.在本项研究中，我们在168例鼻咽癌组织和49例鼻咽炎性组织中检测CKS1和其下游分子P27的表达情况。结果显示，相对于非肿瘤性鼻咽上皮，CKS1在鼻咽癌中显著高表达，特别是在有淋巴结转移的鼻咽癌组织中高表达(P<0.05)。而P27鼻咽癌组织中低表达(P<0.05)。并且，CKS1和P27的表达在鼻咽癌组织中存在负相关。Kaplan-Meier生存曲线显示，CKS1高表达的患者生存期要短于低表达的患者；但是，P27的表达情况与患者生存时间无关。多因素Cox相关性分析证实，CKS1高表达是一个鼻咽癌的独立预后影响因素。.接着，Western-Blot证实鼻咽癌细胞5-8F经γ射线照射后12小时中CKS1蛋白表达升高，在24小时降低。细胞存活实验证实，CKS1过表达的鼻咽癌细胞5-8F和HNE1接受伽马射线照射后的凋亡率明显低于对照组。流式细胞动力学分析证实，CKS过表达的细胞处于S期的显著增多，并且接受γ射线照射后凋亡率要低于对照。这些实验结果提示CKS1可能影响鼻咽癌细胞对射线的敏感性。.在鼻咽癌细胞中沉默CKS1基因，导致细胞凋亡。Western-Blot实验证实CKS1低表达后启动了BCL-2和Caspase凋亡通路，并且细胞信号通路分子p-mek1/2,p-ERK1/2，p-MDM2失磷酸化。实验结果提示，CKS1基因在鼻咽癌中可能是通过MAPK,P53/MDM2通路影响细胞增殖和存活的。.在本项研究工作中，我们发现了CKS1蛋白高表达是鼻咽癌的一个独立预后因子。CKS1基因可能是通过MAPK,P53/MDM2通路影响鼻咽癌细胞增殖，及降低鼻咽癌细胞的射线敏感性的。这些结论为临床更好的靶向治疗鼻咽癌提供了理论依据和线索。