清热化痰法对青霉素在AECOPD痰热证大鼠模型肺组织转运能力的影响

The study refers to the domestic and international research foundation and method of ambrohexel effecting the concentration of antibiotics in the human body lung organism, imitating and duplicating AECOPD（syndrome of phlegm and heat） pathological big rat model, comparing with ambrohexel, observing the influence of Louqinzhisou on the ability of penicillin transship in the rat model lung organism , whether or not improving density of penicillin in the rat model lung organism, and studying mechanism of effect. The study adopt HPLC-MS/MS to measure concentration of penicillin in organism samples , ELISA to measure the content of NE, MUC and MUC5AC, RT-PCR to analyze the MUC5AC level in plumonary tissue, HE and AB-PAS to count the bronchiolar epithelium goblet cell,chart-script software to analyze the shape and quantity of pathological tissue. Meaning: 1 Beneficial explorations of TCM and WM are made to reduce antibiotic dosage, shorten antibiotics use time, lower the side effect to the human body to treat COPD patient.2 Providing a kind of new way of thinking and method for Chinese herbal medicine research, namely from the angle of raising the medicine density in the partial focus organization to study the treatment special feature of TCM.

借鉴国内外氨溴素对抗生素在人体肺组织中浓度影响的研究基础上,模拟复制AECOPD痰热证大鼠模型,西药以氨溴索为对照,观察以清热化痰法指导下的蒌芩止嗽煎对青霉素在大鼠肺组织中转运能力的影响，即能否提高其在肺组织中浓度，为临床选择中药作为AECOPD抗生素治疗的辅助用药提供实验依据，并初步研究其作用机制。方法采用HPLC-MS/MS法测定生物样品中青霉素浓度；ELISA法测定血清中NE、BAIF中MUC、MUC5AC含量；RT-PCR法检测肺组织MUC5ACmRNA表达；HE及AB-PAS染色进行杯状细胞计数；图文分析软件进行病理组织形态定量学分析。意义:1为中西医结合治疗AECOPD患者在减少抗生素使用剂量,缩短抗生素使用时间,降低对人体的副作用作一个有益探索； 2 为中药研究提供一种新思路和方法,即从中药协助提高局部病灶组织中药物浓度角度去研究中医药治疗。

呼吸道感染是导致COPD急性加重的一个重要因素之一，多由细菌感染诱发，因此在选择敏感抗生素的同时，还应考虑抗生素在肺部组织中的浓度与疗效之间的关系。因此研究用适当的方法促进抗生素在肺组织内的转运，提高其肺内感染区域的浓度，也是提高COPD抗感染效果的研究途径之一。本研究在借鉴国内外氨溴素对抗生素在人体肺组织中浓度影响的研究基础及方法上，从基础和临床研究角度出发探究以清热化痰法指导的蒌芩止嗽煎能否提高抗生素在AECOPD痰热证肺组织中的转运能力，为临床上选择中药作为AECOPD抗生素治疗的辅助用药提供依据。基础研究结果提示：用药15分钟后清热化痰方能提高 AECOPD 痰热证大鼠肺组织中的青霉素浓度，并且疗效优于仅仅针对“痰”而立法的二陈汤和西药氨溴索。清热化痰方可能减少黏蛋白和气道杯状上皮细胞计数, 降低血清NE和灌洗液中MUC5AC，并通过不同程度增加单位面积上的肺泡个数、增加肺泡腔面积、保护弹力纤维等因素达到改善COPD肺组织受损的形态结构。提示清热化痰法可以提高青霉素在AECOPD痰热证大鼠模型肺组织中的转运，其作用机制可能是通过：⑴降低NE表达水平，阻断了NE诱导多种炎症细胞因子的基因表达与黏蛋白分泌的通路，降低了炎症反应强度，改善了抗生素在气道内杀菌的微环境条件，从而促进青霉素在肺组织内的正相扩散作用；⑵减少气道黏液分泌，降低黏液纤毛清除功能受损程度，减轻气道粘液阻塞，从而利于抗生素在肺组织中的渗透和弥散；⑶通过不同程度改善肺组织受损的形态结构，降低受损肺泡结构对抗生素的渗透限制来协助抗生素在肺组织中的正相扩散。临床研究结果：清热化痰方同氨溴索一样具备协助提高局部病灶组织中药物浓度的优势，其作用机制可能是通过降低NE,减少黏液分泌，减轻气道阻塞，促进抗生素在肺组织中的正相扩散。此外，二者均有助于改善AECOPD患者的临床症状,在单一症状方面各具优势，但清热化痰法更有助于改善患者治疗一周后的生活质量。通过上述基础和临床研究提示我们在COPD急性加重期细菌感染的病人，中药治疗可以协同抗生素发挥作用，有提高其在肺组织中的药物浓度的潜在趋势，从而缩短抗生素使用时间及剂量，以合理的剂量和合理的使用时间达到良好的疗效，一方面降低抗生素作用于人体的副作用，如在一定程度上避免二重感染、耐药菌生成等并发症；另一方面减缓药物治疗费用上升对社会 和家庭所造成的经济负担。