杏仁核对吗啡撤退负性情感及其诱发的复吸的调控作用及其神经生物学机制研究

The affective states of morphine withdrawl powerfully motivate drug-seeking behaviour and may trigger relapse to morphine, therefore exploring the regulation mechanism of morphine withdrawl induced affective states is very important to relapse. At present only known central of amygdala(CEA) is the main brain area of regulating fear and anxiety related affective states, thus speculate CEA may participate in regulating the relapse induced by the affective states of morphine withdrawl. Therefore this project aims to use different subtype GABAergic neuron-Cre mice and loxp-AAV system,combined with morphine withdrawl induced mice conditional place aversion behavior,the elevated pulse maze and sweet water self-administration to research the function of different subtype neurons of CEA in the affective states of morphine withdrawl and it-induced relapse.And use optogenetics,in vitro electrophysiology and immunology to explore its neural circuits and neurobiology mechanism.This research will accelerate the understanding of the neurocircuits and neurobiology mechanisms of relapse after morphine withdrawl, then provide the indications and theoretical basis for clinical interventions to drug relapse.

吗啡撤退诱发的负性情感是长期慢性使用吗啡个体复吸的主要动机，研究吗啡撤退负性情感的调控机制对于治疗戒毒后复吸显得尤为重要，目前知道杏仁核是调节焦虑、恐惧等负性情绪反应的主要脑区，推测CEA对吗啡撤退负性情感诱发的复吸起着重要的调控作用。本项目旨在利用不同亚型GABA神经元Cre 转基因小鼠和loxp-腺相关病毒，结合吗啡撤退诱发的小鼠条件性位置厌恶，高架十字迷宫和糖水主动摄取行为，对杏仁核不同类型抑制性神经元在吗啡撤退负性情感及其诱发的复吸中的作用进行研究，并利用光遗传学操控的电生理技术和免疫荧光探讨其发挥调控作用的神经环路和生物学机制。本研究将促进对药物戒断后复吸相关神经环路和生物学机制的了解，为药物戒断后复吸的防治提供理论依据和干预新思路。

【研究背景】：药物成瘾是一种反复发作的慢性脑疾病，主要表现是强迫性觅药，一旦停药就出现严重的负性情感反应。这种负性情感是戒断综合征的动机核心，也是药物维持使用和复吸的关键。杏仁中央核(CEA)是参与情绪调控的主要结构，很多研究发现其在恐惧和焦虑相关负性情感中发挥重要调控作用，因此推测其对吗啡撤退负性情感诱发的复吸起着重要的调控作用，研究清楚CEA在药物戒断负性情感及其诱发复吸中的作用及其神经生物学机制，对治疗药物成瘾戒断后负性情绪诱发的复吸有着重要的理论指导意义。.【研究内容】：研究杏仁核抑制性神经元对吗啡撤退负性情感的调控作用；探讨杏仁核调控吗啡撤退负性情感的神经环路和生物学机制；以及杏仁核抑制性神经环路对吗啡撤退负性情感诱发的复吸的调控作用。.【主要成果】：1.发现吗啡撤退时，杏仁核PV 中间神经元产生动作电位所需的阈值更低，活性增强。2.光遗传学抑制吗啡撤退时已激活的杏仁核PV 中间神经元，减少了吗啡撤退诱发的焦虑，烦躁不安和快感缺失相关负性情绪，而直接光激活杏仁核PV中间神经元活性，可诱发出吗啡撤退类似的负性情绪相关表型。3.吗啡撤退时光抑制杏仁核的PV神经元，可显著抑制杏仁核脑区CRH的mRNA 水平，且CEA脑区PV神经元与CRH神经元存在很多连接。.【关键数据】：明确慢性吗啡撤退时杏仁核脑区PV中间神经元细胞膜的兴奋性更高，导致其活性增强；证明了杏仁核PV 中间神经元正向调控吗啡撤退诱发的负性情绪相关表型；提示杏仁核PV神经元通过正向调控CRH神经元活性来正向调控吗啡撤退时的负性情绪。.【科学意义】：首次明确了杏仁核的PV神经元通过影响CRH神经元的活性正向调控了吗啡撤退时的负性情绪，这对指导临床防治药物成瘾戒断后的复吸提供了科学依据，为筛选新的戒断后复吸的药物提供理论指导。