HO-1高表达的供者源性tolDC过继输注诱导灵长类动物同种移植耐受

诱导供者特异性免疫耐受是器官移植的理想策略。作为天然安全的免疫调节剂，致耐受性树突状细胞（tolDC）可能为移植耐受的诱导提供具有抗原特异性而又相对便宜的有效策略。迄今已证明，多种不同的tolDC在啮齿类动物均能显著发挥免疫调节作用而延长移植物存活，但尚难以达到完全耐受。如何提高tolDC的致耐受能力是目前此策略成功的关键。最新研究发现，HO-1是tolDC抑制T细胞反应的关键分子，阻断HO-1使tolDC丧失免疫负调节能力。因此大幅上调HO-1表达极有可能显著提高tolDCs的致耐受能力，使诱导完全耐受成为可能。本项目拟在相关前期工作基础上，采用HO-1的高效诱导剂CoPP，在体外诱导产生高表达HO-1的供者tolDC，以其过继输注为基础，辅以适当的短期免疫抑制，首次在灵长类大动物同种肾移植模型尝试诱导供者特异性免疫耐受的可行性，并系统研究其免疫学机制，如获成功将为其应用于临床奠定基础。

血红素加氧酶-1（HO-1）在诱导移植免疫耐受过程中发挥重要作用。最近研究发现，在致耐受性树突状细胞（tolDC）发挥抑制T细胞反应的过程中HO-1非常关键，阻断HO-1的表达可使tolDC的致耐受性消失。主动上调HO-1的表达是否能增强tolDC诱导免疫耐受的能力尚无报道。.在本项目中，体外采用低剂量GM-CSF 及IL-4培养BALB/c小鼠及食蟹猴骨髓来源树突状细胞（BMDCs），贴壁的未成熟BMDCs作为tolDCs用于实验。使用COPP诱导小鼠及食蟹猴tolDCs高表达HO-1（HO-1hi TolDCs）；SnPP处理的tolDCs作为对照细胞；LPS用于刺激DC成熟；抗CD3/CD28抗体用于刺激naïve T细胞增殖。在体内实验，C57BL/6受者小鼠经尾静脉过继输注不同处理的BALB/c小鼠来源的imDCs（5x10*6），7天后以 BALB/c小鼠为供体行腹部异位心脏移植，术后观察并比较各组移植心存活时间。.结果显示，CoPP处理的imDCs表达HO-1显著升高，这种高表达HO-1的imDCs可有效抵抗LPS诱导的成熟、显著抑制同种异体反应性T细胞增殖、体外能诱导产生更多的同种异体调节性T细胞。在小鼠心脏移植实验中，我们将供者来源的HO-1高表达的imDCs在移植前7天过继输注，可显著延长BALB/c- C57BL/6腹部异位心脏移植模型中移植物的存活时间、有效抑制移植物急性排斥反应。不仅如此，我们还检测到过继输注至小鼠受者体内的imDCs在移植后主要分布至受者脾脏，并能够在受者体内维持HO-1的高表达水平，且移植术后一周的受者T淋巴细胞对供者脾细胞仍然呈明显的免疫低反应性。.总之， 本项目的体外及体内实验均证实，体外产生的HO-1hi TolDCs均有更强的调节同种异体免疫反应的能力，为临床上借助tolDCs转输诱导移植耐受提供重要的实验依据。