DNA甲基化在HBV感染患者CD4+T细胞分化中的作用及机制研究

Hepatitis B virus (HBV) infection is a global health problem. The differentiation of CD4+ T helper cells to specialized subsets has been known to be involved in viral clearance during HBV infection. Chromatin accessibility regulates expression of lineage-defining master regulators that programme selective gene expression, resulting in distinctive phenotypes. Epigenetic modifications play an important role in helper cell lineage commitment and plasticity. HBV has been implicated as a potential trigger of the epigenetic deregulation. Nevertheless, how epigenetics regulate the differentiation of CD4+ T helper cells in chronic hepatitis B (CHB) remains unclear. Irregular DNA methylation status of lineage-specific cytokines were found in our previous study. We hypothesized that the unbalance of Th cells subpopulation in CHB attribute to epigenetic modification. Our study aims to investigate how DNA methylation affect the differentiation of Th cells in CHB. Ideally, this study will provide considerable views of immune responses and new target to break immune tolerance in CHB.

辅助性T（Th）细胞亚群免疫应答失衡在HBV感染慢性化过程中发挥了关键作用。研究表明，Th细胞分化受表观遗传机制的精密调控。各Th细胞亚群特异性细胞因子及转录因子独特的表观遗传修饰决定了亚群分化方向。HBV可以引起宿主细胞表观遗传学状态改变，但表观遗传调控在慢性HBV感染Th细胞分化异常中的作用尚不明确。我们的前期工作发现，慢性HBV感染患者Th细胞分化特异性细胞因子甲基化修饰异常，可能在影响慢性HBV感染Th细胞失衡中具有重要作用。我们推测，表观遗传调控机制可能是慢性HBV感染Th细胞分化失衡的分子基础。我们拟在临床、动物模型及细胞水平，研究DNA甲基化改变在慢性HBV感染Th细胞分化中的作用及作用机制。将为打破慢性HBV感染HBV免疫耐受提供新的靶点，为CHB治疗提供新的思路，具有重要的理论意义和应用价值。

乙型肝炎病毒（HBV）感染过程中往往伴随辅助性T（Th）细胞亚群的免疫应答失衡，但其在不同HBV感染状态下具体分化方向的不同和分化调节机制以及表观遗传调控对HBV感染Th细胞分化异常中的作用尚不明确。本课题受国家自然科学基金项目（项目批准号：81371832）资助，通过体内研究及体外细胞模型验证相结合的方式，阐明HBV感染与CD4+T细胞分化之间的关系，揭示HBV感染状态下DNA甲基化对CD4+T细胞分化的调节机制，寻找打破HBV感染中HBV免疫耐受的靶点。本课题从2014年1月开始至2017年12月，利用山东大学齐鲁医院肝病科构建的慢性乙肝研究队列和样本数据库，研究了乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染慢性化和重症化发生发展过程中HBV感染对CD4+T细胞亚群关键因子DNA甲基化修饰的作用；以HBV感染者外周静脉血及HBV转基因小鼠脾脏来源的初始CD4+T细胞为研究对象，通过细胞体外诱导分化，利用甲基化抑制剂干预关键基因甲基化表达从而明确关键基因甲基化对CD4+T细胞分化的调节机制；建立HBV转基因小鼠模型，通过基因干扰等技术研究甲基化调节药物在抗HBV感染中的治疗作用。此外，课题组还研究了HBV感染过程中辅助性T细胞相关因子的表观遗传修饰、固有免疫因子等因素对HBV感染发生、发展的影响，在课题组原有工作基础上进一步阐明表观遗传修饰在HBV感染发生中的作用。在本课题研究经费资助下，本课题组共发表SCI收录论文30篇（均标注基金号），培养博士研究生7名，硕士研究生7名，圆满完成预期任务。