Barf蛋白调节Th17细胞分化的机制及其在慢性HBV感染中的作用研究

多种因素调节Th17细胞的分化成熟，HBV感染可诱导Th17的分化成熟障碍。Barf蛋白是新近发现的，具有可调控Th17分化作用的关键分子。我们研究发现，HBV感染的慢性化和重症化过程均伴有Th17细胞的分化成熟障碍。本课题拟研究不同HBV感染状态下Th17细胞的分化规律，以及Barf蛋白如何发挥对Th17分化的调节作用。我们拟首先建立体外培养刺激外周血活体组织体系和HepG2.2以及转染HBV的HepG2.2.15细胞体系，分析IL-17和IL-22等Th17效应分子对肝细胞的生物学作用；然后建立HBV感染小鼠动态演变模型，运用反义寡核苷酸干扰等技术，研究HBV病毒与Barf的相互作用以及对Th17分化的影响。我们希望通过本课题的研究，能够进一步阐明HBV感染状态下Barf蛋白调控Th17细胞分化的机制。本研究对于打破HBV感染后免疫耐受、恢复机体免疫功能，寻找新的分子靶向，具有重要意义

乙型肝炎病毒（HBV）感染发生发展进程中均伴有Th17细胞的分化成熟障碍，急性HBV感染机体后可发生慢性化和重症化，Th17细胞免疫反应在HBV感染过程中的表达规律尚未完全明确，而对Th17细胞免疫反应的调节机制也缺乏深入的认识。本课题受国家自然科学基金项目（项目批准号：81171579）资助，通过体内研究和体外细胞模型验证相结合的方式，阐明HBV感染与Th17细胞之间的规律，揭示HBV感染状态下barf蛋白对Th17细胞的调节机制，寻找针对调节Th17细胞免疫反应的分子靶标。本课题从2012年1月开始至2015年12月，利用齐鲁医院肝病科构建的慢性乙肝研究队列和样本数据库，研究了乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus，HBV）感染慢性化和重症化发生发展过程中Th17细胞及其调节因子barf蛋白等的表达规律；构建了稳定表达HBV的肝细胞体外细胞系，研究了IL-17细胞因子对HBV复制的生物学作用，利用抗体阻断和iRNA干扰技术，阐明了IL-17发挥抗HBV作用的分子通路；建立了HBV转基因小鼠模型，通过基因干扰等技术研究barf蛋白对Th17细胞分化和抗HBV效应，探讨barf蛋白对乙型肝炎疾病进展的影响。此外，课题组还研究了HBV感染过程中辅助性T细胞相关因子的表观遗传修饰、固有免疫因子等因素对HBV感染发生发展的影响，初步阐明了表观遗传修饰在HBV感染发生发展中的作用。在本课题研究经费的资助下，本课题组共发表SCI收录论文30篇（均标注基金号），培养博士研究生7名，硕士研究生5名，圆满完成预期研究任务。