PHEX酶在牙本质矿化过程中的作用及机制研究

我们前期工作发现，对牙本质矿化起关键调控作用的牙本质基质蛋白1（DMP1）在牙本质细胞外基质中以两种活化蛋白形式存在（37K、57K），且蛋白水解部位均为X－Asp腱。由于PHEX酶（X染色体上与肽链内切酶有同源性的磷酸调节酶）特异性断裂X－Asp腱，我们推测PHEX作为特异性水解酶，在DMP1水解活化和牙本质矿化中起重要作用。研究通过比较Hyp鼠（PHEX敲除）与正常鼠、XLH患者（PHEX缺失）与正常人的DMP1、37K、57K的表达水平差异，分析PHEX酶在DMP1水解活化中的作用；通过构建rDMP1、rPHEX表达载体在细胞内研究PHEX酶对DMP1的直接水解作用；脉冲追踪实验观察DMP1在PHEX调控下的时间、空间活化过程。研究拟在蛋白水平，通过体内、体外实验对PHEX在牙本质矿化过程中的作用机制进行揭示；为进一步阐述DMP1的作用机理提供依据，为牙本质缺陷症的治疗确立新的靶点。