NFATc2在缺氧下调FOXP3表达干预GVHD作用中机理研究

移植物抗宿主病(GVHD)严重影响异基因造血干细胞移植的疗效。研究发现：CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)能改善GVHD，而FOXP3是Treg细胞发育和维持功能所必需的特异性核转录因子。我们前期实验首次发现低氧及低氧模拟物氯化钴(CoCl2)能明显下调FOXP3蛋白表达，这一过程并不依赖于低氧诱导因子-1α（HIF-1α），而活化T细胞核因子NFATc2可能参与这一下调过程。借助于动物GVHD模型我们同时发现缺氧加重了GVHD。本课题拟以这些前期发现为基础，通过实时定量PCR、Western blot、siRNA、Chip探讨NFATc2与FOXP3的关系，并希望通过高氧及NFATc2抑制剂处理移植动物，阐明两种干预措施对GVHD的改善作用以及NFATc2在缺氧下调FOXP表达、加重GVHD的机理所在，从而为临床治疗GVHD提供新思路、新方法。

移植物抗宿主病(GVHD)严重影响异基因造血干细胞移植的疗效，研究发现：CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)能改善GVHD，而Foxp3是Treg细胞发育和维持功能所必需的特异性核转录因子。.本项目对Foxp3基因的转录调节机制进行了细致的研究与探讨，并获得一系列研究成果：首先创新性研究发现低氧及低氧模拟物氯化钴(CoCl2)能明显下调Foxp3蛋白表达，但深入研究表明这一过程并不依赖于低氧诱导因子-1α（HIF-1α）；进一步实验发现活化T细胞核因子(NFATc2)在低氧及低氧模拟物氯化钴(CoCl2)下调Foxp3蛋白表达过程中发挥重要作用；通过应用NFATc2抑制剂FK506反复验证，得出NFATc2参与了Foxp3基因的转录调节；应用荧光素酶报告基因检测AML1对Foxp3表达的影响发现，转录因子AML1能明显上调Foxp3基因表达；最后课题组成功建立缺氧干预移植小鼠GVHD的模型，通过给予不同环境氧浓度，我们得出高氧环境可明显延长GVHD小鼠生存时间。同时，通过83例儿童异基因造血干细胞移植的临床研究，我们同样发现供者移植物CD4+CD25+Treg细胞高水平表达者能明显减轻儿童异基因造血干细胞移植后急性GVHD的发生率；从50例恶性血液病移植患儿的研究中发现供者移植物CD4+CD25+Treg细胞高水平表达者并未增加移植后恶性疾病复发，移植后CD4+CD25+Treg细胞在减轻急性GVHD的同时保留了移植物抗肿瘤作用。.本研究充分显示了Treg细胞改善GVHD的良好作用，并有望通过改变环境氧浓度及NFATc2抑制剂调节Foxp3、Treg细胞表达，从而达到改善GVHD的目的。