博德特氏菌矿化1,2,4-三氯苯的途径及其关键基因的确定

1,2,4-三氯苯(1,2,4-TCB)是环境中普遍存在的氯苯类污染物的典型代表，微生物矿化是去除这类污染物的最有效、最彻底的环境友好型生物修复方法。本项目采用前期工作中已证明能够矿化1,2,4-TCB为CO2的菌株(博德特氏菌F2)为研究对象，拟探明其矿化1,2,4-TCB的途径与关键基因。同位素示踪法阐明该菌矿化1,2,4-TCB的动力学过程；提取、分离与纯化代谢生成的中间产物，GC-MS与HPLC-MS分析与鉴定产物的结构，解析1,2,4-TCB矿化的途径，阐明母体化合物-中间产物-终产物的消长关系；在明确该菌矿化1,2,4-TCB主要步骤的基础上，采用转座子突变，并结合基因文库筛选的方法克隆出关键降解基因；以Southern杂交探明降解基因在该菌中的定位。研究结果有助于阐明该菌矿化1,2,4-TCB的机制，并为其在修复氯苯类污染土壤中的应用提供科学依据。