硫酸软骨素蛋白多糖在未成熟大鼠脑损伤后髓鞘化障碍发生机制中的作用

脑白质损伤是引起早产儿脑瘫和认知缺陷的主要原因，脑白质损伤后导致的髓鞘化障碍与脑瘫和认知缺陷密切相关，但髓鞘化障碍的机制目前仍不清楚。本课题组前期研究观察到脑白质损伤后形成胶质瘢痕，并导致少突胶质细胞髓鞘化障碍。本项目拟通过少突胶质前体细胞培养，观察胶质瘢痕主要成分硫酸软骨素蛋白多糖对少突胶质前体细胞增殖、迁移、分化的影响及其重要信号调节途径；同时通过3日龄未成熟大鼠脑缺氧缺血损伤模型，应用形态学、免疫组化、分子生物、神经行为学等技术，探讨硫酸软骨素蛋白多糖与少突胶质前体细胞的损伤及髓鞘化障碍的确切关系，同时观察β1整合素等信号通路在硫酸软骨素蛋白多糖分子作用过程中的调控；并通过抑制硫酸软骨素蛋白多糖的产生，验证少突胶质前体细胞损伤及髓鞘化障碍的重要分子机制。通过这些研究，为进一步阐明早产儿脑白质损伤后髓鞘化障碍的机制及修复提供新的思路。

脑白质损伤是引起早产儿脑瘫和认知缺陷的主要原因，脑白质损伤后导致的髓鞘化障碍与脑瘫和认知缺陷密切相关，但髓鞘化障碍的机制目前仍不清楚。本课题组前期研究观察到脑白质损伤后形成胶质瘢痕，并导致少突胶质细胞髓鞘化障碍。本项目通过少突胶质前体细胞培养，观察胶质瘢痕主要成分硫酸软骨素蛋白多糖对少突胶质前体细胞增殖、迁移、分化的影响及其重要信号调节途径；同时通过3日龄未成熟大鼠脑缺氧缺血损伤模型，应用形态学、免疫组化、分子生物、神经行为学等技术，研究硫酸软骨素蛋白多糖与少突胶质前体细胞的损伤及髓鞘化障碍的确切关系，同时观察β1 整合素等信号通路在硫酸软骨素蛋白多糖分子作用过程中的调控；并通过抑制硫酸软骨素蛋白多糖的产生，验证少突胶质前体细胞损伤及髓鞘化障碍的重要分子机制。本项目分离体研究和在体研究两部分。.第一部分：离体细胞培养研究取得以下重要结果：.1、硫酸软骨素蛋白多糖能抑制体外培养的少突胶质前体细胞的分化和成熟，甚至导致死亡，细胞可聚集成团，分化时突起减少、粗短而紊乱，次级以上分支少见。.2、受硫酸软骨素蛋白多糖抑制的少突胶质细胞，其β1整合素mRNA在分化第3天和第5天时表达均降低，同时β1整合素蛋白在第3天时有所降低，第5天时显著降低。.3、硫酸软骨素蛋白多糖抑制少突胶质前体细胞的分化和成熟与β1整合素的表达抑制相关，提示其可能通过抑制β1整合素通路而抑制少突胶质前体细胞的分化。.第二部分：在体研究结果：.1、HI后7d NC和星形胶质细胞在白质区域表达增加。.2、大鼠侧脑室注射cABC抑制胶质瘢痕的形成。.3、大鼠消化CSPGs后远期成熟OL增加。.4、大鼠消化CSPGs后促进OL突起发育，大鼠消化CSPGs后运动学习能力提高。.5、大鼠消化CSPGs后运动的平衡和协调能力增强。.6、在第1-4天定位航行实验结果显示消化CSPGs后HI大鼠学习能力增强。.7、水迷宫实验测定认知功能：（1）在第 1-4 天（P59-P62）定位航行实验结果显示HI+Chase ABC注射组学习能力优于HI组。（2）在第 5 天（P63）空间探索实验结果显示HI+Chase ABC注射组记忆能力优于HI组 。. 通过这些研究，为进一步阐明早产儿脑白质损伤后髓鞘化障碍的机制及修复提供新的思路。现在已完成项目预定的所有内容，达到预期结果。