CXCR2信号通路在宫内感染导致未成熟脑髓鞘化障碍中的作用及机制研究

The periventricular white matter injury induced by intrauterine infection/inflammation is the main reason of cerebral palsy and cognitive decline in premature infants and the immune response play an important role in this events.The granulocytes and extracellular CXCR2 signaling pathways play a key role in the neurological immune response. However,it is still not clear if this signaling pathway involved in the dysmyelination during perinatal inflammation response.In intrauterine infection animal model and granulocyte-oligodendrocyte progenitor cell coculture system,the immunohistochemical staining,Real-time PCR,Western blot,ELISA and behavioral test were used to evaluate CXCR2 signaling pathway in the recruitment of granuloctes and periventricular white matter injury in the immature mouse brain, and we further evaluate its relationship with neonatal white matter injury. Moreover, by upregulation and downregulation the CXCR2 signaling pathway for granulocyte recruitment, we evaluate their function in immature brain dysmyelination.This project will help to further investigate the mechanism of immune response of immature brain induced by perinatal infection/inflammation and shed light on neuroprotection.

宫内感染/炎症导致的脑白质损伤是引起早产儿脑瘫和认知缺陷的主要原因之一,与免疫炎症损伤密切相关。近期研究发现，中性粒细胞CXCR2信号通路在多种疾病免疫炎症损伤中起重要作用。宫内感染脑损伤时，此信号通路是否介导中性粒细胞激活，导致未成熟脑白质髓鞘化障碍，目前尚未报道。本项目拟通过新生小鼠宫内感染脑损伤体内实验和中性粒细胞与少突胶质前体细胞共培养体外实验，采用免疫组化、Real-time PCR、Western blot、ELISA和行为测定等技术，验证CXCR2、CXCR2配体（CXCL1，CXCL2）及调控的中性粒细胞在新生小鼠脑内的时空表达情况以及与不同阶段少突胶质细胞损伤的关系；通过调控CXCR2受体及其信号通路的关键分子，观察宫内感染时CXCR2信号通路在未成熟脑髓鞘化障碍中的作用，从而为深入研究宫内感染/炎症时未成熟脑发育的免疫反应机制及其防治提供新的理论依据。

背景.宫内感染导致的脑白质损伤是引起早产儿脑瘫和认知缺陷的主要原因之一,与免疫炎症损伤密切相关。近期研究发现，中性粒细胞CXCR2信号通路在多种疾病免疫炎症损伤中起重要作用。围产期感染脑损伤时，此信号通路是否介导中性粒细胞激活，导致未成熟脑白质髓鞘化障碍，目前尚未报道。.方法.本项目拟通过围产期感染脑损伤体模型，采用免疫组化、Real-time PCR、Western blot、ELISA和行为测定等技术，验证CXCR2、CXCR2配体（CXCL1，CXCL2）及调控的中性粒细胞在胎鼠与新生鼠脑内的时空表达情况以及与不同阶段少突胶质细胞损伤的关系；通过调控CXCR2受体及其信号通路的关键分子，观察宫内感染时CXCR2信号通路在未成熟脑髓鞘化障碍中的作用。.结果.研究结果显示：（1）LPS注射后至连续5天，模型组，模型组+CXCR2阻断剂两组体重均低于正常对照组、CXCR2阻断剂对照组；（2）模型组、模型组+CXCR2阻断剂组于造模后6h、12h、24h、48h配体CXCL1、CXCL2 mRNA表达均显著升高,而CXCR2在造模后6h，生后感染+CXCR2阻断剂组表达量高于生后感染组。而在造模后12h、24h、48h三个时间点，模型+CXCR2阻断剂组与模型组CXCR2受体蛋白的表达无统计学差异（P>0.05）。（3）P14进行MBP染色，可见生后感染组和生后感染+CXCR2阻断剂组较对照组的胼胝体区髓鞘形成明显减少。.结论：CXCR2信号通路可能在围产期感染起重要作用，阻断CXCR2新，本研究为深入研究围产期感染脑损伤的免疫反应机制及其防治提供新的理论依据。