阻断TRAIL死亡受体通路对未成熟鼠脑白质损伤的保护作用

早产儿脑白质损伤（PWMI）是引起脑瘫和认知缺陷的主要原因，目前尚缺乏有效的防治措施。本课题组前期研究发现未成熟鼠脑缺氧缺血性（HI）损伤后脑组织肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（TRAIL）基因激活，可能是少突胶质前体细胞选择性易损的机制之一。本项目拟通过建立HI损伤的细胞和动物模型，应用免疫组化、分子生物学、神经行为学和病理学等技术，研究神经胶质细胞在生理状态下TRAIL及其受体的分布；观察HI损伤前后TRAIL及其受体在不同神经胶质细胞表达的动态变化，及HI损伤时TRAIL的细胞来源；观察TRAIL对少突胶质细胞凋亡、分化及髓鞘化的影响；并通过可溶性TRAIL死亡受体DR5的封闭作用，观察阻断TRAIL死亡受体通路对HI损伤的神经保护作用。通过本研究阐明PWMI时TRAIL死亡受体通路在少突胶质前体细胞凋亡和分化中的作用，为PWMI的防治提供新思路。

早产儿脑白质损伤（PWMI）是引起脑瘫和认知缺陷的主要原因，目前尚缺乏有效的防治措施。本课题组前期研究发现未成熟鼠脑缺氧缺血性（HI）损伤后脑组织肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体（Tumour necrosis factor-related apoptosis- inducing ligand，TRAIL）基因激活，可能是少突胶质前体细胞选择性易损的机制之一。本项目通过建立HI损伤的动物模型，并通过可溶性TRAIL死亡受体DR5（sDR5）的封闭作用，观察阻断TRAIL死亡受体通路对HI损伤是否具有神经保护作用。利用不同组别脑组织芯片筛选差异基因并经qPCR验证，挑选出3个miRNA：rno-miR-34c-5p、rno-miR-204-5p、rno-miR-764-5p。挑选出的3个miRNA进行慢病毒载体构建及慢病毒包装后侵染少突胶质前体细胞（oligodendrocyte progenitor cells，OPCs），再利用TRAIL诱导凋亡，证实miR-34、miR-204、miR-764基因下调后，其细胞凋亡程度增加。本研究说明sDR5能够阻断TRAIL死亡受体通路，而miR-34、miR-204、miR-764基因在TRAIL诱导细胞凋亡过程中，能够起到阻断保护作用，进一步阐明PWMI时TRAIL死亡受体通路在OPCs凋亡分化中作用，深入了解PWMI机制。