基于microRNA-499-线粒体途径生脉饮抑制心力衰竭心肌细胞凋亡的分子机制研究

In the failing heart, multiple structural changes are known to occur. Cardiomyocyte apoptosis, is the key pathogenesis and progression of heart failure. The molecular mechanisms underlying these changes of the myocardium have been extensively studied, Recently it has become evident that microRNA-499 plays a key role in these structural changes of the heart. Shengmaiyin, as a widely used CHinese herbs, has been proved in our previous research, it can inhibit cardiomyocytes apoptosis in CHF by protecting mitochondrion..In our research, to study the role of miRNA-499 in the heart, and the effects of Shengmaiyin on CHF Cardiomyocyte apoptosis by targeting miRNA-499, CHF model rats, isolated heart with Langendorff and I/R induced Cardiomyocyte cell were treated with Shengmaiyin. Then,The heart function,Pathology, apoptosis were tested. we measured its expression of microRNA-499 and its target CnAαand CnAβ, to unveil the mechanisms of the effects of Shengmaiy on CHF.

心肌细胞凋亡是心力衰竭病理过程中的关键环节，新近发现microRNA-499可通过调控线粒体功能抑制细胞凋亡，可能成为治疗心力衰竭的新靶标。本课题组前期研究证实，经典益气养阴方剂生脉饮能有效抑制心肌细胞凋亡，且对凋亡细胞的线粒体具有保护作用。.基于以上理论和研究基础，本项目应用生脉饮分别干预CHF大鼠、离体灌注心脏及缺氧处理的心肌细胞，从整体、器官和细胞不同层次，观察其对大鼠心功能、神经内分泌系统、心肌细胞形态、线粒体超微结构及心肌细胞凋亡的影响，证实其对心肌细胞凋亡的保护作用。同时深入阐明生脉饮对microRNA-499表达的影响，揭示其通过调控miRNA-499表达，作用于其靶蛋白CnAα和CnAβ，进而抑制Drp1去磷酸化减少线粒体分裂，最终达到抑制心肌细胞凋亡的完整作用途径和确切分子机制，为中药复方治疗心力衰竭提供新的作用途径和理论依据。

心肌细胞凋亡是心力衰竭病理过程中的关键环节，新近发现microRNA-499可通过调控线粒体功能抑制细胞凋亡，可能成为治疗心力衰竭的新靶标。本课题组前期研究证实，经典益气养阴方剂生脉饮能有效抑制心肌细胞凋亡，且对凋亡细胞的线粒体具有保护作用。. 基于以上理论和研究基础，本项目应用生脉饮分别干预CHF大鼠、离体灌注心脏及缺氧处理的心肌细胞，从整体、器官和细胞不同层次，观察其对大鼠心功能、神经内分泌系统、心肌细胞形态、线粒体超微结构及心肌细胞凋亡的影响。试验结果如下：. 1. 生脉饮干预CHF模型大鼠结果显示：生脉饮可改善CHF大鼠症状、减轻心肌细胞损伤和凋亡，降低血清FFA含量，改善心肌细胞能量代谢。. 2. 心肌细胞体外实验结果显示：生脉饮可通过调节 miRNA-499表达，减轻缺氧引起的心肌细胞线粒体损伤，抑制细胞凋亡，提高细胞活力。. 3. 临床试验结果显示：生脉饮能够明显改善慢性心衰患者的心功能分级、Lee心衰积分、中医证候积分以及运动耐量和生活质量水平。且在治疗心功能分级及对中医症候积分的疗效上，明显优于单纯西药治疗的对照组。. 总之，通过临床、动物模型和细胞不同层次的研究，本研究基本阐明心力衰竭时 miRNA-499 通过线粒体途径影响，证实生脉饮可通过调控 Mirna-499 表达通过线粒体通路，改善CHF大鼠症状和心肌细胞能量代谢，抑制心肌细胞 凋亡的作用。