基于AMPK通路探讨生脉饮干预“心肌代谢重构”防治慢性心力衰竭的机制

Ventricular remodeling accompany with abnormal energy metabolism is the pathological basis of chronic heart failure. For treating chronic heart failure, it is not enough only through inhibiting RAAS system excessive activation to delay the ventricular remodeling. It is necessary to modulate “Myocardial metabolic reconstruction”. Qi and Yin deficiency is the common syndrome of heart failure, reinforcing Qi and Nourishing Yin can prevent and treat chronic heart failure through improving myocardial metabolic reconstruction, but its mechanism has not yet been elucidated. Our previous study (No.81202797) found that activating AMPK signaling pathway is the key to modulate myocardial metabolic reconstruction. Therefore we propose the hypothesis: reinforcing Qi and Nourishing Yin prescription “Shengmaiyin” can modulate energy generation, storage and usage, improve myocardial metabolic reconstruction, combined with RAAS inhibitor to prevent the ventricular remodeling, in order to prevent and treat of chronic heart failure. We plan to use heart failure in vivo model and oxygen and serum deprived myocardial cellsmodel as the research object, explore the mechanism of Shengmaiyin in regulating AMPK pathway, improve metabolic reconstruction to treat of chronic heart failurefromthree levels of function, morphology and metabolic.This study has clinical guiding significancefor enriching qi and nourishing Yin theory, the formulas of Chinese and western medicine synergies applications.

伴随能量代谢异常的心室重构是慢性心力衰竭的病理基础。单纯通过抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活，延缓心室重构，以防治慢性心力衰竭的疗效欠佳，而同时干预“心肌代谢重构”非常必要。气阴两虚是心力衰竭常见证型，益气养阴方药可防治慢性心力衰竭，改善心肌代谢重构，但其机制尚未阐明。我们前期（No：81202797）研究发现，AMPK信号的激活是改善心肌代谢重构的关键。故提出：益气养阴方药“生脉饮”多靶点调节能量生成、储存和利用三个环节，改善心肌代谢重构，并与RAAS抑制剂协同延缓心室重构，防治慢性心力衰竭的假说。拟以心力衰竭大鼠在体模型、缺氧和无血清的离体心肌细胞为研究对象，从功能，形态，代谢三个层次，探讨福辛普利协同生脉饮调节AMPK通路，改善心肌代谢重构，防治慢性心力衰竭的机制。本研究不仅丰富和拓展益气养阴方药理论，而且指导临床中西医药协同增效防治慢性心力衰竭提供依据。

心力衰竭是许多心血管疾病的终末阶段，多种机制参与其中，本项目认为能量代谢异常导致心肌纤维化及出现心室重构是慢性心力衰竭的病理基础。临床常规通过抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)过度激活，延缓心室重构，疗效欠佳。气阴两虚是心力衰竭常见证型，益气养阴方药可防治慢性心力衰竭，改善心肌代谢重构，但其机制尚未阐明。.本项目采用结扎左冠状动脉前降支加力竭式游泳复制慢性心力衰竭模型，利用代谢组学和转录组学等方法，从功能，形态，代谢三个层次，探讨生脉饮和诺心妥对慢性心力衰竭大鼠保护疗效，其次，明确生脉饮调节能量代谢通路相关靶点保护心肌细胞，抑制心肌纤维化等效应；为了进一步明确生脉饮起效的可能机制，通过利用代谢组学（UPLC-Q/TOF/MS），技术，采集并分析CHF模型大鼠血清的代谢数据，鉴定生脉饮治疗CHF抑制心肌纤维化的靶点代谢标志物并与NT-proBNP、Gal-3进行Pearson相关性分析，预测并在体验证生脉饮治疗CHF抑制心肌纤维化的作用靶点，以阐明生脉饮抑制心肌纤维化，治疗CHF的作用机制，为临床应用生脉饮治疗CHF提供实验依据，丰富生脉饮益气养阴的科学内涵。.离体部分建立：缺氧和无血清的离体心肌细胞为研究对象，体外培养H9C2大鼠心肌细胞建立糖氧剥夺/复糖复氧（OGD/R）模型，在明确生脉饮（SMY）改善OGD/R损伤的药效基础上，采用高通量转录组测序分析技术，定位SMY改善H9C2大鼠心肌细胞损伤相关的关键基因和信号通路，结果显示在转录组水平上，阐释SMY通过多靶点改善以CERB为核心的代谢和凋亡通路，改善H9C2大鼠心肌细胞损伤的分子机制。本项目通过在体离体实验相结合，通过代谢组学转录组学等技术，从形态，代谢功能等层次，明确生脉饮防治心衰的靶点及机制，本研究不仅丰富和拓展益气养阴方药理论，也为防治慢性心力衰竭提供实验依据。