ADAM33及T细胞因子在维吾尔族人群哮喘气道血管重塑中的作用机制研究

哮喘是当今全球最为常见的慢性疾病之一。哮喘气道重塑的发生先于临床症状的出现，其发生机制有待阐明。课题组预实验提示：1.ADAM33基因存在与维吾尔族人群哮喘相关的SNP和哮喘易感性或保护性的单体型，该基因可能通过降低肺功能，导致哮喘的发生发展；2.ADAM33 mRNA在哮喘患者静脉血中呈异常高表达；3.哮喘患者气道血管的面积和数量增加。本研究拟从气道壁血管的增生与重塑入手，将已证实哮喘发病与ADAM33基因突变相关的维吾尔族人群的临床数据引入到研究中，采用体内(哮喘组和对照组气管活检组织)标本检测和体外(哮喘患者气道血管内皮细胞、平滑肌细胞的培养模型)干预实验的方法，探讨在哮喘气道血管重塑、病情分期、FEV1%下降中ADAM33的主导作用；验证辅助性T细胞因子对ADAM33的影响作用，阐明ADAM33在哮喘发生、发展中的作用机制和调控因素，为通过阻断该通路和基因治疗防治哮喘提供理论依据。

目的：在前期研究工作的基础上，增加ADAM33基因多态位点检测，验证该基因与维吾尔族人群支气管哮喘及其表型的的关联性；探讨哮喘患者气道血管重塑与病情分期的关系；研究助性T细胞因子对气道壁血管内皮细胞和平滑肌细胞中ADAM33表达的水平影响，阐述ADAM33在哮喘发生、发展中的作用机制和调控因素。方法：采用病例-对照的关联研究方法。结果：1.ADAM33基因T1、T2、V4位点基因型在哮喘组和对照组中分布差异有统计学意义（χ2=8.064、8.013、11.737，P=0.018、0.018、0.003）。等位基因频数分布显示T1（C）、T2（A）、V4（G）位点均增加了哮喘发生的相对危险度（OR=2.080、2.139、1.912）。T1（TT和TC）、T2（GG和AG）和V4位点（GG和CC）基因型轻、中、重度哮喘患者中分布频率差异均有统计学意义（均P<0.05）。连锁不平衡分析显示哮喘组中Hap4（CACAC）、Hap5（TACAG）显著高于对照组（9.6%比4.8%、6.8%比2.8%）（χ2=4.545、4.377，P=0.033、0.036），Hap2（CATGC）显著低于对照组（20.4%比30.4%）（χ2=6.597，P=0.010）。2.中、重度哮喘患者在气道壁血管数量和面积（TTA）、平滑肌面积（MSA）、平滑肌束厚度（TASM）、以及基底膜厚度（TRBM）等指标与对照组比较差异均有统计学意义（P<0.05）。3. 在哮喘患者气道壁血管内皮细胞和平滑肌细胞中，随着时间增加，IL-4与IL-13刺激组，ADAM33的表达有升高的趋势。随着浓度增加，INF-γ刺激组ADAM33的表达有明显降低的趋势；IL-4与IL-13刺激组ADAM33的表达有升高的趋势。结论：ADAM33基因多态性可能与新疆维吾尔族人群哮喘及其严重程度有关，该群体中可能存在哮喘易感的单体型或保护性的单体型；哮喘气道壁血管重塑与病情严重程度分期相关；辅助性T细胞因子IFN-γIL-4和IL-13可能通过抑制或增加ADAM33的表达，作用在气道壁血管内皮细胞和平滑肌细胞上，从而影响气道壁血管的重塑，进而抑制或促进哮喘的发生发展。