记忆T细胞在移植耐受中的作用机制的研究

研究背景和意义：记忆T细胞的活化及其介导的排斥反应难以控制是耐受诱导失败的主要原因，本项目的研究，有利于阐明记忆T细胞在移植耐受中作用机制，并为进一步研发新型靶向治疗药物诱导移植耐受提供理论依据。.研究内容：① 新型共刺激分子（如OX40和ICOS）和γ公共链/mTOR信号通路在记忆T细胞的产生、存活及效应功能中的作用。 ② 以胰岛移植为模型，靶向新型共刺激分子或γ公共链/m TOR信号通路诱导记忆性T细胞免疫耐受，以及记忆性T细胞耐受敏感性或耐受抵抗的机制。.预期研究结果：① 新型共刺激分子（如OX40和ICOS）和γ公共链/mTOR信号通路是记忆T细胞产生、存活与凋亡及发挥效应功能的关键信号分子；②靶向共刺激分子OX40或ICOS以及γ公共链/mTOR信号通路能有效延长小鼠胰岛移植的移植物存活时间，并能诱导供体特异性免疫耐受。

研究背景：记忆T细胞是诱导耐受的主要障碍之一，是关键的耐受抵抗的效应细胞，越来越受到关注，由于我们对移植模型中记忆T细胞所介导的移植排斥的调节机制和分子通路知之甚少，因此缺乏抑制记忆T细胞所介导的移植排斥的有效、可靠的策略。研究表明，记忆T细胞介导的排斥反应需要多种共刺激分子和生长因子的参与，如OX40和mTOR信号等，本项目研究新型共刺激分子和mTOR信号通路如何调节记忆T细胞的生成、存活及发挥功能，诱导移植耐受的机制。. 研究内容：（1）OX40和mTOR信号对记忆T细胞产生、存活及效应功能的作用；（2）OX40和mTOR信号对记忆T细胞凋亡和存活的影响；（3）靶向OX40和mTOR信号通路能否延长小鼠胰岛移植物存活时间。. 完成情况：上述研究内容均已完成。完成初始T细胞和记忆T细胞的制备、培养、增殖、功能检测等研究，证实了OX40共刺激通路和mTOR信号在记忆T细胞产生、存活、增殖及发挥效益功能中均有重要作用，起到负性调节作用，有利于诱导记忆T细胞无反应状态，可能成为诱导移植免疫耐受的靶点，并在小鼠胰岛移植模型中证实了抑制OX40共刺激通路和mTOR信号通路可有效延长小鼠胰岛移植物存活时间。. 结果：（1）OX40在记忆性T淋巴细胞表面高表达，且阻断Ox40共刺激分子通道可明显延长胰岛移植物的存活时间;(2)阻断OX40/OX40L和CD40/CD154共刺激通路可抑制记忆T细胞增殖，延长小鼠胰岛移植物存活时间，诱导耐受。（3）阻断OX40/OX40L共刺激通路可有效促进CD4CD25+T细胞免疫抑制功能，OX40共刺激分子在其中发挥负性调节作用。（4）mTOR信号在初始和记忆T细胞表达；（5）抑制mTOR信号可抑制记忆T细胞IFN-γ, IL-2, IL-4的表达水平，升高IL-10的表达；（6）抑制mTOR信号，记忆性CD8+T细胞Bcl-2基因表达增高， Bax基因表达降低，记忆性CD4+T细胞Bcl-2基因表达降低，Bax基因表达增高；（7）抑制mTOR信号可刺激记忆性CD+T细胞凋亡，不影响记忆性CD8+T细胞凋亡，对记忆性CD4+和CD8+T细胞的增殖均无影响；（8）抑制mTOR信号通路可延长Rag-/-受体小鼠胰岛移植物存活时间，诱导移植耐受。