基于中药组方"谱-效"关系和蛋白芯片技术研究过敏康调节Th17/Treg亚群改善过敏体质的机制

Allergic constitution is the background and soil of varieties of allergic diseases. Preliminary studies revealed that traditional Chinese medicine Guo Min Kang has good effect on allergic constitution, and fingerprints of the recipe in vitro had been analyzed. According to the newly proposed idea of TCM compound "spectrum-effect" relationship, combining latest modern immunology knowledge of Th17/Treg cell subsets, the following hypothesis is put forward, "One of the important mechanisms of Guo Min Kang to improve allergic constitution is through regulating cytokines of Th17/Treg cell subsets and the whole function of the signal pathway with the effective component". Based on these, this study will combine fingerprint results in vitro of Guo Min Kang and in vivo serum medicinal chemistry, establish the fingerprint of HPLC-DAD and HPLC-ELSD which can reflect its effectiveness. At the same time, use protein chip technology to detect allergic constitution people`s cytokines and signal pathways changes of Th17/Treg before and after the intervention of Guo Min Kang. Summarizing the results above, to establish spectrum-effect relationship network of Th17/Treg subsets regulated by Guo Min Kang, and verify the network nodes, scientifically interpret the targets and mechanisms of improvement of allergic constitution by Guo Min Kang, provide the basis for the clinical use of medicine to improve allergic constitution. This is of great significance to guide the prevention and control of allergic diseases.

过敏体质是多种过敏性疾病产生的背景与土壤。前期以中药组方"过敏康"作为主方干预过敏体质收到了良好的效果，并对组方进行了体外指纹图谱分析。本研究根据新近提出的中药复方"谱-效"关系理念，结合现代免疫学对Th17/Treg细胞亚群的最新认识，提出假说："过敏康"通过有效成分谱调控Th17/Treg亚群细胞因子及其信号通路的整体功能是改善过敏体质的重要机制。据此，拟采用信息融合技术，建立"过敏康"体外指纹图谱与体内血清药物化学相结合的HPLC-DAD和HPLC-ELSD指纹图谱；并采用蛋白芯片技术检测"过敏康"干预前后过敏体质人群Th17/Treg亚群细胞因子及信号通路的整体变化。整合以上研究结果，建立"过敏康"调节Th17/Treg亚群的"谱-效"关系网络，并对网络调控节点进行验证，旨在科学阐释该组方改善过敏体质的有效靶点和作用机制，为临床合理用药提供依据，对于指导过敏性疾病防治具有重要意义。

过敏体质是多种过敏性疾病产生的背景与土壤。王琦教授的经验方“过敏康”是调整过敏体质的效方。前期以中药组方“过敏康”作为主方干预过敏体质收到了良好的效果，并对组方进行了体外指纹图谱分析。在本项目中，我们进一步建立过敏康的血清化学动态图谱，初步发现过敏康体内移行的三种成分，即升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、5-O-甲基维斯阿米醇。该结果为阐明过敏康药效物质基础及调体机制研究提供科学依据，也为过敏康颗粒的质量控制提供了标准，确保安全性和有效性。.本项目建立过敏性鼻炎大鼠模型，通过过敏康干预，发现：中药过敏康可显著抑制鼻黏膜IL-8、IL-6、IL-1β、TNF-α的含量，减轻鼻粘膜的炎症反应，并显著上调过敏性鼻炎模型大鼠血清中IFN-γ的表达，而明显抑制IL-4、IL-6、IgE、IL-17、TGF-β1的表达，从而纠正失衡的Th1/Th2、Th17/Treg的细胞因子网络。.本项目采用蛋白芯片技术检测“过敏康”干预前后过敏体质人群 Th17/Treg 亚群细胞因子及信号通路的整体变化。发现蛋白水平上，干预前后差异最明显的蛋白有PARC、IL-6 R、L-Selectin、MIF等，这些蛋白的下调与调理过敏体质有相关。基因水平上，干预前后显著差异pathway有吞噬体、溶酶体、细胞因子-细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路、粘附连接等。过敏康可以调节这些通路，影响DC的成熟，改变DC的捕捉、吞噬、提呈抗原等作用的程度，减少激活初始T细胞并对Th细胞的调节作用，从而调节过敏体质，达到治疗过敏性鼻炎的目的。.以上结果明确了调理过敏体质相关的基因、通路及蛋白，证实了中药过敏康通过多种途径多个靶点调理过敏体质，能达到治疗过敏性鼻炎的目的，为过敏体质的进一步深入研究奠定了坚实的基础。.本项目还通过在TTD数据库以及Drugbank数据库中检索过敏性鼻炎的疾病靶点。结合过敏康的药物组成及血清移行成分，在SwissTargetPrediction数据库中进行靶点预测，得到可能的作用靶点。该结果初步探索了过敏康干预过敏性鼻炎的网络作用靶标，亦发现过敏康干预过敏体质的机制与干预过敏性鼻炎的机制有所不同，开拓了未来的研究路向。