嗜酸乳杆菌调节Treg/Th17平衡缓解牛乳β-乳球蛋白过敏机制的研究

牛乳β-乳球蛋白过敏严重影响婴幼儿利用优质乳蛋白，危及其身体健康，是亟待解决的食品安全问题。益生菌防治过敏因其安全、有效而备受关注。.以往认为益生菌通过调节Th1/Th2平衡减轻过敏，课题组在益生菌对Th1/Th2平衡影响的前期探索中新发现：Treg/Th17功能失调亦可能在过敏疾病中发挥重要作用，但对益生菌调控Treg/Th17平衡的机制尚不清楚。故本项目以前期筛选获得的、显著抑制β-乳球蛋白过敏的嗜酸乳杆菌为研究对象，首先探明嗜酸乳杆菌通过Toll样受体/NF-κB信号传导途径激活的树突状细胞在Treg/Th17细胞平衡、分化中的作用，继而构建β-乳球蛋白过敏小鼠模型，剖析过敏病程中Treg/Th17失衡与Th1/Th2平衡的相关性，阐明嗜酸乳杆菌逆转Treg/Th17失衡对过敏发生发展的影响。研究结果将为揭示益生菌缓解过敏机制提供新理论基础，为进一步防治婴幼儿牛乳过敏提供新思路。

观察嗜酸乳杆菌对牛乳β-乳球蛋白（β-lg）过敏小鼠Th17/Treg细胞平衡及血清抗体水平的影响，以研究其缓解过敏反应的作用。用牛乳β-lg和氢氧化铝的混合液腹腔注射诱发BALB/c小鼠致敏，建立动物过敏模型。将实验动物随机分为空白组、致敏组与热致死嗜酸乳杆菌组。HE 染色观察各组小鼠小肠病理形态学；显微镜检小鼠血液中嗜酸粒细胞和嗜中粒细胞的数量；ELISA法测定各组小鼠血清中IgE抗体及与Treg、Thl7细胞分化有关的细胞因子的含量；Real-time PCR法检测 TGF-β，IL-17A，CD25，Foxp3，RORγt，IL-10，STAT5和STAT3 mRNA的表达量；流式细胞术检测小鼠Treg及Th17细胞亚群的改变。实验结果显示嗜酸乳杆菌干预可有效改善小鼠的BLG过敏症状，其肠道炎症、炎症细胞数目和IgE产生显著降低（P<0.05）。与过敏组比较，嗜酸乳杆菌组小鼠的Thl7型细胞因子含量及其相应转录因子表达量显著下降（P<0.05），Treg型细胞因子 含量及其相应转录因子表达量显著上升（P<0.05）；流式细胞术检测嗜酸乳杆菌组小鼠脾脏中的Thl7细胞百分比降低，而Treg细胞百分比显著增加（P<0.05），且Thl7/Treg比率与Th2型和Thl7型细胞因子呈正相关（P<0.05）。此外嗜酸乳杆菌组小鼠的STAT3 mRNA表达显著下降，STAT5mRNA表达显著上升（P<0.05）。以上结果表明口服嗜酸乳杆菌可通过调节Th17/Treg细胞失衡缓解β-lg过敏。