活血通络法介导PI3K/AKT信号通路调控膝骨关节炎软骨细胞凋亡的机制研究

Knee osteoarthritis, the most common degenerative disease among the middle-aged and elderly, has become a global focus of public health. A large number of studies have shown that the abnormal apoptosis of chondrocytes plays a key role in the generation and development of the osteoarthritis of knee.. On the basis of previous studies, according to TCM theory blood stasis causing rheumatism，vessel invaded by prolonged illness, this study takes mice KOA cartilage cells apoptotic model, the apoptotic model of mice KOA cartilage cells by vitro cultured, and mice knee articular chondrocyte apoptosis model induced by sodium nitroprusside as research objects.The purpose is to study the regulation mechanism on the method of removing blood stasis and freeing vessel to mediate chondrocyte apoptosis by PI3K/AKT signal transduction pathway, histopathology, immunohistochemistry, cell biology and molecular biology and other modern science and technology means, to lay the basic theory of removing blood stasis and freeing vessel in preventing and treating osteoarthritis and discuss the modern biology of TCM theory removing blood stasis and freeing vessel, to reveal the TCM theory of law kidney dominating bone marrow. Then enriching and developing the scientific connotation of removing blood stasis and freeing vessel.

膝骨关节炎（KOA）是中老年人最常见的退变性疾病，随着我国社会人口老龄化的进程，KOA发病率呈逐渐上升趋势，已成为“人口与健康”问题关注的热点。大量研究表明软骨细胞的异常凋亡在膝骨关节炎的发生发展中起到关键性作用。. 本课题在前期研究的基础上，根据 中医“瘀血致痹”“久病入络”理论，以小鼠KOA软骨细胞凋亡模型、体外培养的小鼠KOA软骨细胞凋亡模型及硝普钠诱导的小鼠膝关节软骨细胞凋亡模型为研究对象，通过免疫组织化学、细胞生物学及分子生物学等现代科学技术手段，研究活血通络法介导PI3K/AKT信号传导通路调控软骨细胞凋亡的机制，进一步奠定活血通络法防治KOA的基础理论，丰富和发展中医药从活血通络法论治KOA产生疗效的可能生物学基础和现代科学内涵，建立从活血通络法论治KOA的现代生物学研究思路和方法学平台。

膝关节骨关节炎(Knee Osteoarthritis，KOA)是一种影响世界各地中老年人的关节软骨退行性疾病，随着现代社会老龄化的不断发展该病的发病率也呈逐渐上升趋势。虽然目前治疗KOA的方法多种多样，但早中期多数患者更愿意选择中医药保守治疗。近年来，随着现代中医药的发展和科技的进步，在中医药中寻找安全有效防治KOA的药物，以提高患者的生活质量、延长寿命成为现代中医药研究的一大热点。我院临床上运用骨痹合剂治疗KOA取得较好的疗效，为进一步探讨其作用机理，本课题基于PI3K/AKT信号传导通路来揭示具有活血通络作用的骨痹合剂防治KOA的分子机制。课题研究发现：骨痹合剂通过灌胃对KOA模型鼠体内作用与骨痹合剂含药血清对体外培养KOA软骨细胞、硝普钠诱导的KOA软骨细胞的作用机制均是通过抑制PI3K/AKT信号通路，下调Bad、Caspase-3、Caspase-9、NF-κB蛋白及基因的表达，增加软骨细胞的自噬能力，上调软骨细胞活性，抑制软骨细胞的凋亡，最终达到治疗KOA的目的。