高分辨率检测人乳腺癌发生发展相关基因的研究

基因改变的多样性导致乳腺癌生物学行为的多样性，因此筛选一组分子标记物，为临床提供更精确的诊断、指导个体化治疗成为当前乳腺癌研究迫切需要解决的问题。本课题组与A.Zetterberg实验室近年发展了定量多基因荧光原位杂交（QM-FISH）技术，可在同一细胞核内检测60-100个基因。本研究在前期实验和原发性乳腺癌的代表性寡核苷酸芯片分析（ROMA）基础上，初筛频繁出现扩增或缺失的基因，采用QM-FISH对乳腺癌进行大样本、多基因、高分辨率分析，检测与验证与原发性乳腺癌发生、侵袭及转移密切相关的基因改变，并检测相应蛋白表达；通过对检测结果与临床病理指标的分析，筛选一组基因（10-20个），作为乳腺癌诊断和预后评估的特异性标记物并探讨其作用机制，据此进行遗传学分类，指导临床采取个体化治疗，提供新的治疗靶点；推广QM-FISH用于乳腺癌及其他常见恶性肿瘤的病理诊断。

成功地治疗乳腺癌主要依赖于早期诊断和适当的治疗。乳腺癌基因改变的多样性导致其生物学行为的多样性，筛选出一组特异性分子标记物，用于肿瘤的早期诊断并指导临床对不同患者采取个体化治疗成为当前乳腺癌研究迫切需要解决的问题。尽管近年发现了一系列乳腺癌基因异常，但仍有大量乳腺癌相关基因及其功能尚不明确。A.Zetterberg实验室近年来发展了QM-FISH（quantitative multi-gene fluorescence in situ hybridization，定量多基因荧光原位杂交）技术，可在同一细胞核内检测多个不同基因(>60个)。本研究在Zetterberg实验室ROMA（Representational Oligonucleotide Microarray Analysis，代表性寡核苷酸芯片分析）研究基础上，筛选出54个与乳腺癌发生发展相关的基因，并收集500例临床病理资料完整的乳腺癌石蜡存档标本（包括淋巴结转移组织），QM-FISH（定量多基因荧光原位杂交）技术检测候选基因在人正常乳腺组织与相应癌组织、淋巴结转移癌组织中的基因拷贝数，免疫组化技术检测各基因的蛋白表达情况，相应分析软件分析基因拷贝数的差异及各基因异常与临床病理指标之间的关系，筛选了12个与乳腺癌发生、浸润及转移相关基因，用于乳腺癌的早期诊断和预后评估，为乳腺癌治疗提供个体化治疗方案和新的治疗靶点，并对乳腺癌进行分子学分类，同时推广QM-FISH作为一种常规病理诊断技术。