SARI蛋白在非小细胞肺癌对ALK抑制剂获得性耐药中的作用机制

ALK inhibitors (crizotinib) is an effective drug for the treatment of EML4-ALK NSCLC fusion gene positive patients, the effective ratio is up to 60%, but many patients get acquired drug resistance in the short term, EMT or mutation of ALK protein lead to ALK inhibitor acquired drug resistance.Our previous study found that SARI protein play a key role in the regulation of EMT in NSCLC, some study report that ALK inhibitor aquried drug resistance have relationship with EMT phenomenon, furthermore we found SARI can binds to ALK protein directly. So we assume SARI protein can adjust EMT phenomenon or binds to ALK protein directly, induces mutation of ALK protein, and finally lead to ALK inhibitor get acquired drug resistance In this study, such as immunoprecipitation, protein purification, crystal analysis methods will be used to prove our hypothesis, if the project can be successful, the mechanism of ALK inhibitor acquired drug resistance will be clarified, and we can also find the SARI binding site of ALK, which provides the basis for the sythesis of drug inhibiting ALK inhibitor acquired drug resistace,and also, SARI can be used as an evaluation index for ALK inhibitor acquired drug resistance.

ALK抑制剂（克唑替尼）是目前治疗EML4-ALK融合基因阳性的非小细胞肺癌(NSCLC)的有效药物，其客观有效率达60%，但很多患者在短期内就对其产生耐药。目前认为ALK抑制剂的继发性耐药与上皮间质化（EMT）或ALK蛋白的构象变化有关系。在前一段的研究中我们发现SARI蛋白能调节NSCLC的EMT,在ALK抑制剂耐药的细胞中，也发现其表达明显下降，不仅如此，SARI蛋白还能与ALK蛋白直接结合。因此我们推测SARI蛋白的缺失能通过调节EMT现象或通过改变ALK蛋白的构象，或通过这两个方面的机制共同使ALK抑制剂产生继发性耐药。在本课题中，我们试图通过免疫沉淀、晶体解析等方法验证该假设的成立，本课题将探明SARI蛋白与ALK蛋白的结合位点，阐明ALK抑制剂继发性耐药的作用机制，为开发逆转ALK抑制剂获得性耐药的药物打下基础，为SARI蛋白作为评价ALK抑制剂继发性耐药的指标提供可行性。

肿瘤的治疗方法主要有手术、放疗、化疗、靶向治疗和免疫治疗。其中分子靶向药物ALK 抑制剂已成为目前治疗肺癌分子靶向药物的研究热点，但ALK 抑制剂治疗有效的患者通常在用药 1 年后就会发生耐药。本研究拟探讨EMT、SARI蛋白、SDH5蛋白在非小细胞肺癌中与ALK抑制剂耐药的关系。在第一部分研究中，我们在体内和体外环境中证实了SARI蛋白及SDH5蛋白对肺癌EMT现象的调节作用。第二部分研究，我们成功通过体外实验证明了SARI蛋白与肺癌ALK抑制剂耐药有密切关系。后续，我们扩展了研究方向，我们发现研究靶点中的SDH5蛋白不仅能调节肺癌EMT现象，而且能调节非小细胞肺癌对放疗的敏感性，收集到208例临床标本验证了此SDH5表达与放疗预后相关。并通过一系列基础实验验证其机制是通过调节p53蛋白的泛素化降解影响肺癌放疗敏感性更令人兴奋的是，SDH5的mRNA可以在血浆中检测到，并和肿瘤组织中SDH5 mRNA水平呈正相关，SDH5可以作为较好的无创性预测放疗敏感性的生物标志物，该发现对于课题的延伸具有重要的意义。