胃癌转移相关microRNA的筛选及调控机制的研究

转移是恶性肿瘤的主要特征之一，并导致患者预后不良。申请者曾证实，血管内皮生长因子C（VEGF-C）可诱导胃癌出现淋巴管生成现象并促进胃癌转移，但VEGF-C的表达调控机制尚不清楚。microRNA（miRNA）是由20多个核苷酸组成的非编码RNA，通过调节癌基因和抑癌基因表达，参与肿瘤发生、发展的多个环节。前期工作中，我们使用新型miRNA表达谱芯片进行转移组和未转移组胃癌miRNA的差异表达谱分析，初步证实两组胃癌中存在多种miRNA显著差异表达，其中miR-145的异常变化最显著，而miR-101则与VEGF-C蛋白表达呈负相关。本研究拟扩大检测样本后最终确定胃癌转移相关miRNA表达谱；验证miR-145、miR-101对胃癌浸润、转移能力的影响以及对VEGF-C等转移相关基因的调控。该研究有助于揭示miRNA调控胃癌转移的分子机制，所获得的miRNA表达谱可为后续研究提供基础平台。

胃癌是我国第三大常见肿瘤，胃癌患者中有90%左右最终死于肿瘤的浸润和转移。深入研究胃癌转移相关的作用机制，筛选介导胃癌转移的关键分子，有望为抑制胃癌转移找到关键的作用靶点。本研究中我们筛选出多个在转移组胃癌中显著低表达和显著高表达的miRNA，并进一步进行体外细胞实验和荷瘤裸鼠体内实验，验证其对胃癌浸润、转移能力的影响；探讨miRNA异常表达的临床病理意义，对其作用机制进行深入研究，阐明其影响胃癌转移的具体分子机制。. 本研究的特色和创新性包括：.1．.本研究首次证实转移组胃癌标本中普遍存在miR-145、miR-214、miR-100、 miR-27b、miR-218、miR-101等表达显著下调和miR-96、miR-122等表达显著上调.2．.发现miR-145具备抑癌基因的作用。首次鉴定了CDH2(N-cadherin，N-cad)为miR-145的直接靶基因，并进一步证实miR-145在胃癌中通过抑制其靶基因CDH2，进而下调MMP (基质金属蛋白酶) -9表达，从而抑制胃癌浸润、转移。.3．.申请者首次揭示了miR-145调控N-Cadherin/Catenin -δ1通路的新机制：证实miR-145过表达通过“Cadherin”平衡恢复细胞膜E-Cadherin表达，而后者可募集Catenin -δ1，进而E-Cadherin/ Catenin -δ1在细胞膜上的连接复合物加强了细胞间的粘附。.4．.首次阐明miR-100通过直接下调靶基因ZBTB7A而发挥抑癌基因的作用。高表达的ZBTB7A还与胃癌患者预后差相关。转录因子C/EBPα通过结合在miR-100上游的启动子区域发挥了上调miR-100表达的作用。.5．.首次证实miR-214能抑制胃癌细胞的增殖、迁移和浸润能力，并进一步鉴定出CSF1 、CREB1是miR-214调控的靶基因。首次在胃癌中将CREB1与肿瘤分期结合，构建了新型预后模型，其预后价值优于肿瘤大小、淋巴结状态或临床分期等单独指标。. 该研究经山东省医药卫生信息研究所检索近5年国内外文献，未发现密切相关文献。研究期间，受本课题资助，共发表第一/通讯作者SCI论文8篇(其中影响因子5分以上5篇，合计影响因子44分)，培养研究生5名，获得山东省高校科研成果奖2项。