胃癌腹膜转移相关基因的筛选及其调控网络的构建

腹膜转移是胃癌死亡的主要原因之一，已发现的转移相关分子不能完全解释其机制。我们课题组建立了一对生物活性稳定、能长期传代培养的人胃癌及其腹膜高转移细胞系，通过基因芯片筛选出248个差异表达基因，但获得的基因缺乏必要的分子间联系，而且由于其调控机制复杂，单基因干预的研究模式难于阐明胃癌腹膜转移调控网络。因此，我们拟通过通路筛选的策略，利用MicroRNA表达谱的差异、随机小干扰RNA和真核cDNA表达策略，建立高效筛选平台，采用随机阻断细胞信号通路等方法，筛选能够特异性影响胃癌腹膜转移的miRNAs、小干扰RNA和cDNA分子，利用生物信息学手段逆向分析推出参与调控的基因，结合文献已获得及与我们筛选发现的多个影响胃癌腹膜转移的单基因相联系，研究众多促进及抑制转移分子的相互关系，初步构建胃癌腹膜转移调控网络，为进一步阐明胃癌腹膜转移机制提供有益的补充。

腹膜转移是胃癌死亡的主要原因之一，已发现的转移相关分子不能完全解释其机制。我们课题组建立了一对生物活性稳定、能长期传代培养的人胃癌及其腹膜高转移细胞系，通过基因芯片筛选出248个差异表达基因，但获得的基因缺乏必要的分子间联系，而且由于其调控机制复杂，单基因干预的研究模式难于阐明胃癌腹膜转移调控网络。因此，我们拟通过通路筛选的策略，利用MicroRNA表达谱的差异、随机小干扰RNA和真核cDNA表达策略，建立高效筛选平台，采用随机阻断细胞信号通路等方法，筛选能够特异性影响胃癌腹膜转移的miRNAs、小干扰RNA和cDNA分子，利用生物信息学手段逆向分析推出参与调控的基因，结合文献已获得及与我们筛选发现的多个影响胃癌腹膜转移的单基因相联系，研究众多促进及抑制转移分子的相互关系，初步构建胃癌腹膜转移调控网络，为进一步阐明胃癌腹膜转移机制提供有益的补充。在本项目的研究中，我们对胃癌腹膜高转移GC9811-P细胞及母系GC9811细胞利用miRNA 芯片检测，筛选出了具有明显差异的153个miRNA分子，分别验证了促癌分子miR-214-3p对细胞的增殖和转移的促进作用及抑癌分子miR-29a-3p、miR-29b-3p对细胞增殖及转移的抑制作用，并初步证明PTEN为miR-214-3p的潜在靶基因之一，HAS3为miR-29a-3p的潜在靶基因之一，为后续作用机制的深入研究，奠定一定的实验基础，为提供新的临床治疗方法提供一定的思路。