MicroRNA调控胃癌干细胞表型形成及相关分子机制的研究

前期工作中我们建立了适合于肿瘤干细胞研究的小RNA组学技术平台，研究发现胃癌干细胞表型受到miR-373和CD44之间表达平衡的影响。为了能多层次、多角度地研究胃癌发生、发展、转移、复发的分子机制，筛选出调控胃癌细胞恶性转化以及影响其遗传性状改变的关键靶标分子或信号通路，本研究以miRNA为着眼点，通过生物信息学预测、蛋白组学、蛋白差异表达分析以及RNA干扰技术分离和鉴定miRNA相关作用蛋白，筛选与胃癌干细胞表型形成及遗传性状改变密切相关的靶标分子或信号通路，为今后设计出针对胃癌干细胞及其亚群的分子诊断方法提供实验参考；以miR-373和E-cadherin的相互作用为切入点，研究miRNA及相关作用元件在胃癌侵袭和转移过程中的作用，为研发特异性地拮抗miRNA及相关蛋白的生物靶向治疗方案奠定理论基础，尝试从源头上消灭胃癌干细胞，阻断胃癌细胞的侵袭和转移。

该项目在国内外期刊杂志发表论文6篇，其中SCI论文5篇，中文核心期刊1篇。待发表1篇。.近年来人们对肿瘤干细胞的认识不断加深，特别是对其表面标志蛋白的研究进展迅速，肿瘤干细胞具有强大的自我更新和分裂增殖能力以及高致瘤性，在肿瘤的发生发展、免疫逃逸、侵袭转移等多个生理环节中扮演重要的角色。.我们应用CD44作为表面标记分析胃癌干细胞在胃癌转移灶和原发灶之间的分布差异，发现CD44表达阳性的肿瘤干细胞亚群在胃癌转移灶内的分布显著增高，并且与miR-373的表达呈现负相关。miR-373 与miR-371a、 miR-371b 及miR-372同属于miR-371-373 簇，在人胚胎干细胞中特异表达。研究表明CD44是miR-373 的下游靶基因，因此，我们在胃癌细胞系内过表达miR-373，结果发现miR-373在体内和体外均可以显著抑制CD44的转录活性，推动胃癌干细胞的表型向已分化的肿瘤细胞表型发生偏移。进一步研究发现，β2-AR信号通路是调控miR-373生物学活性的上游调控原件之一。胃癌细胞主要通过β2-AR信号通路来激活其下游PKA反应元件，影响STAT3与miR-373启动子区域的靶位结合，从而打破CD44与miR-373之间的动态平衡，最终实现对胃癌干细胞表型的调控。β2-AR信号通路不但能促进CD44、Nanog、Rex-1等“干性”因子在胃癌细胞内的表达，该通路的激活还可以导胃癌细胞产生耐药性，抵抗化疗药物对肿瘤细胞的杀伤作用。Lgr5在化疗耐药，肿瘤转移中发挥了重要作用，Sox7和Lgr5可能成为胃癌预后检测和治疗的靶点。.我们工作为研究肿瘤干细胞可塑性的调控奠定了实验基础，同时也为监控胃癌病程的进展、制定个性化的干预方案提供理论参考。.目前项目组正在其他课题的资助下继续深入研究，未来的兴趣点是希望明确细胞可塑性介导的靶向定植在肿瘤转移中如何发挥作用。