二苯乙烯苷对胶质细胞的双向调控在保护脂多糖诱导的帕金森病模型中的作用

帕金森病（PD）的发病率和致死率逐年上升。目前病因未明且临床上仍缺乏有效治疗药物。针对胶质细胞（包括小胶质细胞和星形胶质细胞）双靶点的药物很可能成为治疗PD的新策略。二苯乙烯苷（TSG）是何首乌的主要药效成分之一，毒性低，具有抗氧化、抗炎、提高学习记忆力以及促进神经营养因子释放等作用。但有关TSG治疗PD的研究未见报道。本课题组预实验发现：TSG保护大鼠中脑黑质内直接注射脂多糖（LPS）造成的多巴胺能神经元损伤；同时改善 LPS 诱导的小胶质细胞激活，促进星形胶质细胞释放多种神经营养因子，提示对胶质细胞的双向调控可能是TSG治疗PD的重要机制之一。因此，本项目拟通过该模型，进一步观察TSG对PD的治疗效果；同时采用大鼠原代中脑神经元-胶质细胞混合培养模型，深入探讨TSG对小胶质细胞介导的神经炎症反应以及星形胶质细胞产生的神经营养作用双靶点的调控机制，为TSG的临床应用提供基础药理学依据。

帕金森病（PD）是一种发病率和致死率逐年上升的神经退行性疾病，病理特征为中脑黑质多巴胺能（DA）神经元变性损伤和纹状体投射纤维丧失。迄今为止，PD发病机制尚不完全清楚。研究发现神经炎症在PD的发生发展过程中发挥重要作用，而小胶质细胞的激活被认为是神经炎症反应的关键所在。当小胶质细胞激活后能够释放多种炎性介质。这些介质的不断产生和积累最终造成周围DA神经元的变性死亡。因此，抑制小胶质细胞介导的神经炎症反应将成为治疗PD的重要靶点之一。星形胶质细胞，是脑内数量最多的细胞类型，具有调节突触间隙内神经递质合成和释放多种神经营养因子等生理功能。研究表明神经营养因子不仅对 DA 神经元具有营养、支持和保护作用，而且诱导神经前体细胞向DA神经元分化。因此，增加星形胶质细胞释放神经营养因子很可能成为治疗PD的重要策略之一。二苯乙烯苷（TSG）是何首乌的主要药效成分之一，毒性低，具有抗氧化、抗炎、提高学习记忆力以及促进神经营养因子释放等作用。但有关TSG治疗PD的研究未见报道。因此，本课题采用大鼠中脑黑质注射脂多糖（LPS）造成DA神经元损伤以及大鼠中脑原代神经元-胶质细胞共培养模型，探讨TSG对PD的防治作用及其机制。结果发现，TSG能够保护LPS诱导的DA神经元损伤，其机制与：(1)抑制小胶质细胞的激活及其释放的多种炎症介质密切有关。具体表现为：i) TSG减少 NADPH oxidase 介导的活性氧自由基的产生；ii) TSG抑制 NADPH oxidase 亚单位 p47 从细胞浆转移至细胞膜；iii)TSG抑制小胶质细胞内 NADPH oxidase下游的 NF-κB 信号通路的激活; (2) 增加星形胶质细胞释放多种神经营养因子密不可分，原因包括：i) 在缺少星形胶质细胞的细胞培养体系中，TSG不能对DA神经元产生营养作用，表明星形胶质细胞是TSG产生神经营养作用的主要靶点；ii) 在单纯星形胶质细胞培养中加入TSG刺激后收集上清液，将其加入单纯神经元培养中能够对DA神经元产生营养作用；iii) TSG能够时间依赖性和剂量依赖性的增加神经元-胶质细胞混合培养体系中神经营养因子的释放；iv) 加入抗体抑制神经营养因子的作用后，TSG对DA神经元的营养作用减弱。综上所述，TSG通过抑制小胶质细胞激活，促进星形胶质细胞释放多种神经营养因子，从而发挥防治PD的作用。