天然抗肿瘤侵袭转移药物活性成分的筛选及鉴定

肿瘤缺氧能引起肿瘤病人病情进展、耐药及预后不良，缺氧能使癌细胞发生EMT并增加其侵袭转移能力。本项目拟建立肿瘤细胞缺氧致EMT的细胞模型，从抗缺氧天然药物活性成分中筛选出具有明显阻断或逆转肿瘤细胞EMT的候选药物；经体内外实验证实其抗肿瘤细胞侵袭与转移活性，揭示其对肿瘤细胞EMT作用；通过信号转导抗体芯片研究候选药物影响EMT的信号转导通路，并利用RNAi技术与拮抗剂对相关信号通路关键分子进行功能抑制，以阐明候选药物发挥阻断或逆转EMT作用的分子机制，从而为筛选新的抗肿瘤转移药物提供理论和实践依据，探索自主研发抗肿瘤新药的有效途径。

本研究以卵巢癌细胞系SKOV3和3AO为研究对象，建立了缺氧诱导EMT的细胞模型，筛选出可阻断缺氧诱导EMT过程的天然中药活性单体成分---人参皂苷Rg3(S)。缺氧诱导使SKOV3和3AO表现出缺氧诱导因子1α（Hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）蛋白水平升高、上皮细胞标志物E-cadherin下调和间质细胞标志物Vimentin上调、细胞形态由铺路石样转变为梭形、细胞体外迁移和侵袭能力增强等EMT特征，这些现象均在Rg3(S)处理后被逆转。机制研究发现，Rg3(S)是通过增强脯氨酰羟化酶（Prolyl hydroxylases，PHDs）和von Hippel-Lindau（VHL）的表达来促进HIF1α经由泛素-蛋白酶体途径降解，进而降低HIF-1α诱导的Snai1表达，最终增强E-cadherin的转录活性而实现其阻断缺氧诱导EMT的作用。卵巢癌裸鼠转移模型的结果同样证实，Rg3(S)不仅能显著降低SKOV3细胞的转移能力，而且抑制了转移癌灶中HIF-1α和Vimentin的表达，增强了E-cadherin的表达。综上，本研究首次通过体内外实验证实Rg3(S)可通过促进HIF-1α的泛素-蛋白酶体降解途径而阻断缺氧诱导的EMT，阻止卵巢癌转移。Rg3(S)有可能成为高效的卵巢癌治疗药物。