人类前体mRNA剪切与多聚腺嘌呤化过程中各效应因子间相互作用关系的结构生物学研究

前体mRNA剪切与多聚腺嘌呤化过程是真核生物转录调控的重要组成部分，但由于参与该过程的效应因子众多且各效应因子均为多亚基复合物，其间相互作用关系复杂，因此该过程的精细运作机制至今仍未得到阐明。本研究项目拟通过蛋白质晶体学方法解析人类前体mRNA剪切与多聚腺嘌呤化过程中前体mRNA剪切因子Ⅰ(CFⅠ) 25KDa亚基与68KDa亚基RRM结构域间形成的"蛋白质-蛋白质"复合物结构；同时尝试获得PABⅡ RRM结构域与poly(A)间、CFⅠ中25KDa亚基与前体mRNA "UGUAA"序列间的两种蛋白质-RNA复合物结构。在利用上述结构信息确定其复合物相互作用机制及结构-功能关系的同时，为阐明人类前体mRNA剪切与多聚腺嘌呤化过程的精细运作机理提供翔实的结构生物学依据。

在本项目执行期间，我们成功完成人类前体mRNA剪切因子Im (CFIm) 25KDa亚基与68KDa亚基RRM结构域蛋白质-蛋白质复合物晶体结构的解析，从结构水平上阐明其相互作用机理，完成了该复合物的结构-功能关系研究；通过蛋白质复合物与mRNA片段的共晶生长，我们在国际上率先获得了2.9Å分辨率的CF Im25/ CF Im68-RRM / RNA三元复合物晶体结构，阐明了人类CFⅠ与前体mRNA “UGUAA”序列之间的相互作用模式；相关研究结果已发表在2011年的Cell Research杂志上(IF：9.417)。PABⅡ蛋白RRM结构域与poly(A)之间的相互作用复合物晶体优化工作尚在进行中，有望在年内取得突破。在项目资助期间，我们共发表标注资助号的SCI研究论文12篇。综观项目执行情况，我们项目研究计划任务目标已圆满完成。