NTF2对视网膜血管内皮细胞屏障功能的保护机制研究

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是世界性主要致盲眼病之一，目前发病机理尚未阐明，临床缺乏有效防治措施。在前期工作中，我们已初步发现"DR抵抗基因"NTF2可以减轻视网膜血管的渗漏，在此基础上，本项目将通过SiRNA技术、腺相关病毒技术改变NTF2表达状态；利用FITC-右旋糖酐40跨内皮通透性测定、跨内皮电阻及EB半定量通透性实验研究内皮细胞屏障功能；采用透射电镜观察TJ形态及数量变化；利用荧光定量PCR技术、Western blot技术研究TJ相关基因Claudins、ZO-1、Occludin、JAM-1的mRNA和蛋白时空表达变化，探讨NTF2保护视网膜血管内皮细胞屏障功能的内在机制。该项目摆脱传统研究思路的束缚，首次研究"DR抵抗基因"NTF2对视网膜血管内皮细胞屏障功能的保护及作用机制，随着该研究的成功开展，将为DR的防治研究开辟新的道路。

糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）是世界性主要致盲眼病之一，目前发病机理尚未阐明，临床缺乏有效防治措施。通过本研究，我们成功构建NTF2病腺相关毒载体；培养人视网膜血管内皮细胞；建立人视网膜血管内皮细胞体外屏障模型；发现上调NTF2表达可保护对体外屏障功能，证实rAAV2-NTF2可上调高糖条件下的视网膜血管内皮细胞紧密连接蛋白Occludin的表达；发现apoA1/apoB比值降低仍是PDR发生高危因素；证实眶后注射FITC-Dextran是观察视网膜血管安全有效的方法。通过该研究，加深了我们对.DR发病机制的了解，并为DR的防治提供了新的思路。