Ghrelin 调控大鼠实验性类风湿关节炎的发病过程及其机制

Rheumatoid arthritis (RA) is a disease characterized by synovitis, chronic autoimmune disease, synovial tissue, cartilage and bone destruction is the basic pathological process. Ghrelin is a growth hormone secretagogue agent endogenous ligand, its main function is to promote growth hormone release and regulate energy metabolism. Recent study found, ghrelin can regulate inflammation and immune response functions. Our preliminary studies have shown that rat knee cartilage cells can express ghrelin and its receptor. The project intends to RA in the rat model of arthritis observed ghrelin and its receptor in the local tissues and cell distribution; exogenous ghrelin or its receptor antagonist in RA disease progression in the role; in vitro cartilage cells with siRNA silencing technology to observe the following indicators: ⑴ by RT-PCR and Western Blot techniques were detected at the level of transcription and translation of siRNA transfected chondrocytes ghrelin gene expression changes; ⑵ cartilage cell function changes; ⑶ indicators of cell proliferation and differentiation of cartilage changes. This study will clarify ghrelin in patients with rheumatoid arthritis and disease progression in its mechanism.

类风湿关节炎（RA）是一种以关节滑膜炎症为特征的慢性自身免疫性疾病，滑膜组织增生、软骨和骨破坏是其基本病理过程。Ghrelin是生长激素促分泌剂的内源性配体，其主要功能是促进生长激素释放和调节能量代谢。新近研究发现，ghrelin具有调节炎症和免疫反应的功能。我们初步的研究表明，大鼠膝关节软骨细胞可表达ghrelin及其受体。本项目拟在大鼠RA模型上观察ghrelin及其受体在关节炎局部组织的表达和细胞分布情况；观察外源性ghrelin或其受体拮抗剂在RA病程进展中的作用；在体外培养的软骨细胞上用siRNA沉默技术，观察以下指标：⑴用RT-PCR和Western Blot技术分别在转录和翻译水平检测siRNA转染后软骨细胞中ghrelin基因表达的变化；⑵软骨细胞分泌功能的变化；⑶软骨细胞增殖与分化指标的改变。本研究将阐明ghrelin在类风湿关节炎发病和病程进展中的作用及其机制。

RA是一种损害滑膜关节的慢性炎症，RA患者常伴有厌食和恶病质，发病率和死亡率均较高。Ghrelin是一种具有多种功能的胃肠激素，其功能包括促进生长激素释放、调节促炎症性细胞因子、控制摄食行为、以及维持机体能量平衡。近年的研究发现Ghrelin还具有其他许多生理功能。我们先前的研究发现，活动期RA患者血浆Ghrelin水平下降；而TNF-和瘦素水平升高。也有其他一些研究者探讨血浆Ghrelin水平和RA的关系，但所得出的结果不尽一致，因而有必要深入研究Ghrelin在RA发病和病程进展中的作用及其机制。. 用免疫组化和免疫荧光染色法观察了Ghrelin及其受体、GOAT在人关节滑膜组织和人成纤维细胞样滑膜细胞（MH7A）的定位与分布，结果发现RA滑膜细胞和MH7A细胞均能稳定地表达Ghrelin；免疫荧光染色表明，Ghrelin阳性物质主要定位于滑膜细胞的细胞质和细胞膜。用ELISA法和酶免疫分析（EIA）法检测了RA患者血清和关节滑液中Ghrelin水平的变化及其与TNF-a的相关性，结果发现，活动期RA患者血清Ghrelin水平显著低于正常对照组(P < 0.05)，而TNF-水平明显高于正常对照组(P < 0.01)；RA患者血清中Ghrelin与TNF-a水平无显著相关性(r＝0.364, P>0.05)。活动期RA患者关节滑液Ghrelin和TNF-a水平均显著高于血清(P < 0.05)，并且 Ghrelin与TNF-a水平呈负相关(r＝0.819, P<0.05)。提示Ghrelin可能与TNF-a共同参与RA的发病过程。. 在II型胶原足底注射法建立的建立CIA小鼠类风湿关节炎模型，Ghrelin（100ug/kg）可改善RA 组小鼠关节滑膜细胞和软骨细胞的损害，减轻RA的病情，提示Ghrelin对RA可能具有潜在的治疗作用。. 在Ghrelin对MH7A细胞增殖、凋亡与分泌活动影响的研究中，我们发现，Ghrelin可通过AKT、ERK1/2和Caspase信号通路抑制人滑膜MH7A细胞的增殖、诱导其凋亡；而且还能够通过Akt/NF-kB信号途径抑制炎症因子IL-6的分泌。. 本研究结果提示，Ghrelin在RA的发病机制中发挥重要作用，其很可能成为RA治疗的潜在性药物靶点。