微泡传递microRNAs在多发性骨髓瘤血管新生中的作用

Nowadays, multiple myeloma (MM) already becomes the most common hematological neoplasm, even more frequently than leukemia. As reported, tumorous angiogenesis is one of the pivotal mechanisms participating in pathogenesis and progression of MM. Recently,extracellular membrane microvesicles (EMV), mainly aggregating and selectively including microRNA in tumorous microenvironment, have been revealed to significantly influence tumorous angiogenesis. Our previous study also confirmed that microRNAs, equipped with multi-target regulatory networks, could play a substantial role in migration and angiogenesis of MM. However, whether MM-derived EMVs also engage in migration and angiogenesis of MM is unknown. Therefore, this study prepares to collect EMVs respectively from MM cell lines and CD138+ plasma cells isolated from primary MM cases, observe how MM -derived EMVs affect vascular endothelial cells, as well as screen the specific microRNAs contributing to tumorous angiogenesis. Subsequently, intervention of EMVs' transduction will be conducted to alter tumor specific microRNA-mediated angiogenesis. Moreover, role of EMVs-mediated microRNA transduction in angiogenesis was further compared among MM cases at different stages. This study looks forward to systemic description on the process of EMV-mediated genetic material transduction in MM,which provides new ideas for target treatment of MM.

多发性骨髓瘤（MM）发生率目前已超过白血病，成为最常见的血液恶性肿瘤。研究表明，肿瘤血管新生是MM发病及进展的重要机制之一。新近发现，肿瘤微环境中富集并选择性内含microRNA的胞外微泡（EMVs）对肿瘤新生血管有重要影响，我们也证实，具有泛靶向调节功能的microRNA影响MM细胞的迁移和血管新生。但MM来源的EMVs是否在此过程中起到重要的传递作用尚不得知。因此，我们拟分别收集源自MM细胞株及经特异性标记CD138分选的原代MM细胞分泌的EMVs，观察其对血管内皮细胞的影响，并筛选参与肿瘤新生血管形成的特异性microRNA；继而通过干预EMVs的传导作用来改变肿瘤特异性microRNA对MM新生血管的影响；并在不同阶段骨髓瘤患者中比较EMVs传递肿瘤特异性microRNA途径的重要性。本研究有望系统阐述EMVs介导的细胞间遗传物质传递在MM中的过程，为MM靶向治疗提供新思路。

多发性骨髓瘤（MM）是第二高发的血液系统肿瘤，骨髓瘤的发生、进展和转移与有利于肿瘤生存的患者体内环境密切相关。携带小分子核糖核酸的外泌体，在骨髓瘤细胞和体内环境中的非肿瘤性细胞之间的相互作用中发挥重要作用。包括蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂在内的新药通过作用于骨髓微环境，显著改善了MM患者的预后。但是随着新药的广泛使用，新药耐药成为临床实践中比较棘手的问题。目前没有可靠的基于骨髓微环境的指标或模型可用于MM新药耐药预测。在MM中，恶性浆细胞在骨髓中具有灶性分布的特点，因此骨髓穿刺标本有抽样误差，不能代表恶性浆细胞在骨髓中的总体分布情况。从血液中通过相对无创的方式获得可靠生物标记物对于MM耐药预测是十分重要的。基于此，本研究首先进行MM血清外泌体的体外分离和鉴定；然后使用真实世界研究（RWS）的方法，收集了我科收治并接收新药治疗的多发性骨髓瘤患者，采集反应体内环境的关键临床指标；并且根据对硼替佐米的不同疗效进行分组，组间比较外泌体携带小分子核糖核酸谱的差异。本研究建立了MM血清外泌体体外检测方法，并证实其内含核酸量与肿瘤负荷成正比；并共纳入204例患者，硼替佐米、沙利度胺和来那度胺组的耐药率分别是36.5%、73.1%和81.8%。血清轻链比≥100、CRP≥ 20mg/L和二线治疗用药增加获得性硼替佐米耐药风险。其中68例患者完善了遗传性检查，1q21扩增是预测原发性耐药的高危因素，并与胆固醇和LDL-C的低水平相关。此外，与硼替佐米有效组相比，硼替佐米耐药患者组中分离的纳米级外泌体携带核糖核酸的水平显著升高，并且其携带的miR-16-5p、miR-15a-5p、miR-20a-5p和miR-17-5p水平显著降低（芯片数据已上传至pubmed共享）。现行的临床检测指标难以预测骨髓瘤药物耐药。携带小分子核糖核酸的血液循环外泌体，为解读骨髓瘤患者体内环境细胞打开了一个窗口；这种新型的细胞间信息交流模式补充了传统的细胞间信息交流机制，并有可能成为潜在的治疗靶点即通过干预微泡携带小RNA分子发挥抗肿瘤作用。