工程化嵌合蛋白FasL修饰供体脾细胞输注为基础的治疗方案通过影响CD8+CD122+PD1+新型调节性T细胞诱导预致敏模型移植免疫耐受研究

Memory cells in the pre-sensitize receipts are currently thought to be a major barrier to tolerance induction in transplantation. We developed a novel protein display technology called ProtEx, to transiently display a chimeric form of FasL on the surface of organs, tissues and cells, which proved to be efficient to induce tolerance in several primary transplant models. Based on these data, we obtained a very good result by displaying SA-FasL on the surface of donor splenocytes, combing blocking OX40/OX40L pathway in the pre-sensitize mice heart transplant model. In our previous data, we found mSA-FasL induced novel CD8+CD122+PD1+ regular T cell, and this group of cells play a critical role in the early stage of transplantation and in the long-term survival of grafts. Major mechanistic studies include the percentages/quantity, effect of rejection inhibiting and mechanism of CD8+CD122+PD1+T cells in immune regulation. The results from this project will clarify the mechanisms, enrich the theory of immunology, and also provide a novel, safe, and applicable approach for the prevention of pre-sensitize rejection.

预致敏受者体内存在的记忆性细胞是诱导移植免疫耐受的重要障碍。本课题组应用体外工程化蛋白修饰技术—ProtEx，使膜型嵌合蛋白Fas配体（mSA-FasL）短暂表达在器官、组织和细胞表面，成功诱导了多种器官初次移植免疫耐受。本课题在此基础上，将mSA-FasL修饰供体脾细胞输注联合阻断OX40/OX40L通路方案应用到预致敏小鼠心脏移植模型中，获得了良好治疗效果。我们前期发现：mSA-FasL诱导产生的CD8+CD122+PD1+新型调节性T细胞在移植后早期及移植物长期存活过程中可能发挥了重要免疫调节作用。本研究拟从mSA-FasL影响CD8+CD122+PD1+新型调节性T细胞产生的比例/数量变化，该群细胞抑制排斥反应的效果和作用机制等方面进行深入探讨。本研究为治疗预致敏排斥提供了一个新颖、有效的方案，并初步阐明相关机制，丰富了免疫学理论。

项目背景：由于初次移植、输血、感染等因素，越来越多的患者体内存在同种反应性记忆性细胞。器官移植后，体内记忆性细胞迅速激活，引起强烈免疫应答和排斥反应，明显影响移植物存活。目前临床尚无有效抑制记忆性细胞的方法。本研究基于SA-FasL蛋白综合干预，延长预致敏模型中移植物生存期，并对其作用机制进行探讨。.主要研究内容：1）明确以SA-FasL 蛋白为基础的联合治疗方案能够诱导预致敏模型中移植物的长期存活。2）明确CD8+CD122+PD1+新型调节性T细胞产生，在诱导及维持移植物免疫耐受过程中发挥重要作用3）对效应性/记忆性等各亚群细胞的抑制作用及其发挥免疫调节作用的机制。.重要结果、关键数据：阐明了SA-FasL蛋白联合anti-OX40L和/或雷帕霉素对预致敏模型中移植物的影响；初步探讨了其作用机制（包括对记忆性T细胞、炎症因子和CD4+和CD8+调节性T细胞的影响）。.科学意义：1）寻找有效抑制记忆性排斥的新干预方法；2）初步阐明了联合治疗方案的作用机制；3）丰富了免疫学理论，为相关研究方案的临床转化提供了一定的研究基础。