RhoA信号通路在嗅鞘细胞形态可塑性中的作用及其机制

嗅鞘细胞移植治疗中枢神经损伤的实验研究显示出潜在的临床应用价值。嗅鞘细胞形态可直接影响其促神经再生的功能，然而对于其形态可塑性的分子机制研究并不清楚。本课题预实验发现，活性RhoA在嗅鞘细胞亚型中呈不同的分布，RhoA的抑制剂阻断了血清引起的嗅鞘细胞形态变化。我们拟将前期工作基础上，采用FRET、显微实时成像等技术手段，观察破坏RhoA活性分布对嗅鞘细胞形态的影响。其次，运用药物、质粒转染,观察RhoA在血清诱导的嗅鞘细胞形态可塑性中的作用。进而，观察LPA激活RhoA对嗅鞘细胞形态的影响。从而正反两方面验证RhoA在嗅鞘细胞形态可塑性中的具体作用。最后，采用western blot、免疫化学和药物阻断，研究参与嗅鞘细胞形态可塑性的RhoA下游信号通路。以期验证我们的假说：RhoA信号通路介导了嗅鞘细胞形态可塑性，为嗅鞘细胞移植治疗神经损伤和脱髓鞘病变的应用基础研究提供新的理论依据。

嗅鞘细胞移植治疗中枢神经损伤的实验研究显示出潜在的临床应用价值。嗅鞘细胞具有形态的多样性。培养的嗅鞘细胞呈现出两种基本的细胞形态类型：一类细胞呈梭形，具有两根或多根突起，突起的长度大于细胞直径，形态类似于雪旺细胞，被称为雪旺样嗅鞘细胞；另一类细胞呈扁平样，无突起，形态类似于星型胶质细胞，被称为是星型样嗅鞘细胞。雪旺样细胞和星型样嗅鞘细胞自发地或在血清刺激下能发生相互转化。目前对于这两类细胞相互转化的分子机制并不清楚。RhoGTPase是一类小GTPases家族成员，在细胞迁移，细胞形态调节等方面均发挥着关键作用。目前该家族成员主要包括，RhoA,Rac1和Cdc42三个成员。在嗅鞘细胞中，发现RhoA介导了LPA和Nogo引起的嗅鞘细胞迁移反应。本课题主要探索RhoA是否参与了嗅鞘细胞形态的可塑性及其作用的分子机制，证实RhoA参与了嗅鞘细胞形态的可塑性,激活RhoA促进扁平样嗅鞘细胞，抑制RhoA促进梭形样嗅鞘细胞转化，并且由下游Myosin-F-Actin信号通路所介导。