TAp63β上调CD137L的分子机制及其在宫颈癌免疫逃逸中的作用研究

The TAp63β and CD137L are important cancer supressors. They are downregulated in cervical cancer and there’s no report whether CD137L is regulated by transcription factor TAp63β. The bioinformatics analysis indicats that there are potential TAp63β binding site on 5’promoter region. Rencent report shows that E6 oncoprotein of HPV degradates TAp63β. Above all, we hypothesize that CD137L is downregualted by downregulation of TAp63β caused by E6 oncoprotein and the downregulation of CD137L will result in the disabling of CD8+T cell and cancer immue escape. According to the present study, we plan to confirm the hypothesis by using luciferase report assay, EMSA, Super EMSA, ChIP, ELISA and animal study. In addition, we will investigate and evaluate the effect of combination of TAp63β and CD137L, which will provid experimental evidence and supporting for the theory of cervical cancer immuno escape and tumor adoptive immunotherapy.

宫颈癌中TAp63β和CD137L均低表达，且二者均有抑制肿瘤的作用，但TAp63β作为重要的抑癌基因和转录因子能否调节CD137L表达，目前尚无报道。我们通过si-RNA、过表达和荧光素酶报告基因等实验初步证实TAp63β能够上调CD137L的表达，且据已有报道HPV表达的E6原癌蛋白能够降解TAp63β蛋白，因此我们推测宫颈癌中存在以下通路：E6通过降解TAp63β间接下调CD137L的表达，致使CD8+T细胞失能引起肿瘤的免疫逃逸。因此，本项目拟通过Realtime PCR、荧光素酶报告基因实验、EMSA、ChIP，以及在体动物实验证实宫颈癌中TAp63β对CD137L的调节，并最终证实上述通路存在。为宫颈癌发生免疫逃逸提供新的理论解释，并为宫颈癌的过继性免疫治疗提供新的策略。

宫颈癌是严重威胁妇女健康的重大疾病，高危亚型HPV感染是导致宫颈癌的重要因素，而免疫系统无法有效识别突变细胞并清除是导致癌症发生并发展原因之一。过继性免疫治疗是通过在体外用特异性的肿瘤抗原激活激活T细胞，回输后识别并杀伤肿瘤细胞的治疗方法，而激活T细胞的过程中，CD137L与其受体的配对是提高识别率的重要因素。本课题通过干扰HPV E6原癌蛋白升高转录因子TAp63β的水平，进而升高CD137L的蛋白水平，使CD137L的表达上调，最终提高T细胞的识别率，起到杀伤肿瘤细胞的作用。本课题目前通过RT-PCR, Realtime PCR等实验初步证实干扰HPV E6后，能够升高CD137L的mRNA水平，并降低IL-8的水平。本课题通过证实上述通路，为宫颈癌发生免疫逃逸提供新的理论解释，并为宫颈癌的过继性免疫治疗提供新的策略。